[发明专利]一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法、材料及应用

说明书

本发明涉及一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法、材料及应用。所述检测方法包括以下步骤：步骤1)制备基底材料：Au@SnSesubgt;2/subgt;纳米复合材料；步骤2)制备AgCit@NiFe‑LDHs纳米复合材料；步骤3)制备AgCit@NiFe‑LDHs纳米复合材料孵化新型冠状病毒抗体的二抗标记物；步骤4)制备检测新型冠状病毒抗原的电化学免疫传感器；步骤5)制备比色检测新型冠状病毒抗原的ELISA免疫传感器；步骤6)制备检测新型冠状病毒抗原的电化学和ELISA免疫传感器的工作曲线。本发明把电化学与比色相结合，用来检测新型冠状病毒，该方法具有较高的灵敏度、较宽的检测范围，较快的检测速度以及操作简单等优点，可用于实际样品的快速检测。

技术领域

本发明属于新型纳米材料、免疫分析和生物传感技术领域技术领域，尤其是涉及一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法技术领域。

背景技术

感染SARS-CoV-2的人可以保持无症状或表现出非特异性临床症状，例如干咳，疲劳，发烧，腹泻和身体疼痛等症状。即使在潜伏期，感染者也具有高度传染性，可以将病毒传播给未感染者。因此，对SARS-CoV-2进行大规模快速诊断测试对于病毒检测、监测和快速管理暴发至关重要。SARS-CoV-2有四种主要的结构蛋白，包括刺突蛋白、膜蛋白、包膜蛋白和核衣壳蛋白。S蛋白是冠状病毒非常重要的表面蛋白，与病毒的传染性密切相关。因此，诊断SARS-CoV-2患者对于有效控制感染的快速传播至关重要。

到目前为止，金标准病毒检测是实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和最准确的实验室方法之一。市售qRT-PCR检测试剂盒的示例有Xpert Xpress SARS-CoV-2检测、CDC2019-新型冠状病毒实时RT-PCR诊断面板、ExProbeTM SARS-CoV-2检测试剂盒、雅培实时SARS-CoV-2RT-PCR试剂盒、和TaqPath COVID-19组合试剂盒。然而，这些方法也有缺点，因为它们耗时，需要专门的实验室设置，配备昂贵的仪器和操作熟练的人员。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中的SARS-CoV-2抗体快速而简单，但需要昂贵的仪器，周转时间长，并且容易出现假阴性结果。因此，仍然迫切需要更便宜、更便携的生物传感设备来促进COVID-19的快速检测。

发明内容

比色免疫测定能够检测目标肉眼读数。电化学生物传感器，具有低成本、便携性、灵敏度和选择性。本发明利用ELISA和电化学以实现新型冠状病毒的灵敏检测。

本发明提供了一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法，所述ELISA生物免疫传感器方法包括：使用96孔板依次将新型冠状病毒抗体、牛血清白蛋白溶液、新型冠状病毒抗原溶液和Ab2生物探针孵育后，利用生物探针对3,3',5,5'-四甲基联苯胺的比色反应。

所述的电化学免疫传感器方法包括：工作电极，参比电极和对电极，新型冠状病毒特异性抗体，牛血清白蛋白溶液，新型冠状病毒抗原溶液，纳米复合材料孵化前列腺特异性抗体的二抗标记物，所述的参比电极为饱和甘汞电极,对电极为铂丝电极，工作电极为玻碳电极。其表面依次修饰金纳米粒子负载导电性较好的二硒化锡(Au@SnSe₂)和具有优异催化性能的镍铁双氢氧化物负载柠檬酸银的纳米复合材料(AgCit@NiFe-LDHs)。

本发明的目的之一使用Au@SnSe₂作为基底材料，AgCit@NiFe-LDHs作为探针材料以实现对电化学信号探针的放大效果。

本发明的目的之二使用AgCit@NiFe-LDHs作为探针材料，以实现对3,3',5,5'-四甲基联苯胺的催化效果。

本发明正是为了解决上述问题缺陷，提供一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法。本发明采用如下技术方案实现。

一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法，本发明所述检测方法包括以下步骤：