[发明专利]一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法、材料及应用有效
| 申请号: | 202211327699.3 | 申请日: | 2022-10-27 |
| 公开(公告)号: | CN116027032B | 公开(公告)日: | 2023-08-25 |
| 发明(设计)人: | 李灿鹏;梁还;赵卉;肖淋 | 申请(专利权)人: | 云南大学 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558;G01N27/27;G01N27/416;G01N21/78 |
| 代理公司: | 昆明盛鼎宏图知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 53203 | 代理人: | 王辉 |
| 地址: | 650000*** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 光电 信号 模式 新型 冠状病毒 检测 方法 材料 应用 | ||
1.一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法,其特征在于,所述检测方法用于非疾病诊断目的,包括以下步骤:
步骤1)制备基底材料:Au@SnSe2纳米复合材料;
步骤2)制备AgCit@NiFe-LDHs纳米复合材料;
步骤3)制备AgCit@NiFe-LDHs纳米复合材料孵化新型冠状病毒抗体的二抗标记物;
步骤4)制备检测新型冠状病毒抗原的电化学免疫传感器;
步骤5)制备比色检测新型冠状病毒抗原的ELISA免疫传感器;
步骤6)制备检测新型冠状病毒抗原的电化学和ELISA免疫传感器的工作曲线,利用方波伏安法SWV和ELISA法对目标物进行检测;
所述步骤1)制备Au@SnSe2纳米复合材料包括:
(1)制备SnSe2
在12-80 mL乙二醇溶液中加入0.3-2 g SnCl2·2H2O和0.3-2 g Se粉末;在混合物中加入0.5-3 mL乙二胺,磁力搅拌30 min后,将混合溶液置于高压釜中,120-180℃保持5 h,得到的产物用去离子水和乙醇洗涤3次;最后,在60°C真空干燥过夜,得到SnSe2待用;
(2) 制备Au@SnSe2
称取3-20 mg步骤(1)制备好的SnSe2纳米花在溶解于1-5 mL DW,然后在上述溶液中加入50 mM的HAuCl4 10-60µL;室温搅拌10分钟后,缓慢滴加0.1-0.6 mL 100mM Na3Cit,磁搅拌30分钟;最后,将悬浮液12000 rpm离心5 min,收集固体产物;
所述步骤2)制备AgCit@NiFe-LDHs纳米复合材料包括:
(1)制备NiFe-LDHs
将0.03-0.3 mmol Fe(NO3)3·9H2O和0.25-1 mmol NiCl2·6H2O分散在10-100 mL水中,然后在上述溶液中加入0.5-3 mmol尿素,搅拌30分钟;将混合溶液移至高压釜中,在120℃下反应12 h,离心冷冻干燥几次,离心收集得到NiFe-LDHs;
(2)制备AgCit@NiFe-LDHs
将0.03-2 g NiFe-LDH、0.2-1 g AgNO3和0.5-3 g Na3Cit溶解在10 ml水中,磁力搅拌30分钟,形成一个白色的球团;放置悬浮液过夜,离心收集,干燥备用。
2.如权利要求1所述一种基于光电双信号模式的新型冠状病毒检测方法,其特征在于,所述步骤3)制备AgCit@NiFe-LDHs纳米复合材料孵化新型冠状病毒抗体的二抗标记物 Ab2bioconjugates 包括:
将新型冠状病毒特异性抗体加入到AgCit@NiFe-LDHs分散液中并在4℃ 条件下搅拌过夜;用PBS洗掉游离的抗体后,加入BSA反应2-12 h将所得溶液离心分离并将沉淀分散在PBS中以获得Ab2/AgCit@NiFe-LDHs生物探针材料,将其储存在4℃备用。
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