[发明专利]一种银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法

权利要求书

1.一种银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将银杏脱壳、去皮后烘干，然后粉碎，过60目筛，得到银杏粉，将银杏粉加入到石油醚中浸泡脱脂，结束后抽滤，干燥，得到脱脂银杏粉；

(2)将脱脂银杏粉加入到氯化钠溶液中进行提取，结束后离心收集上清液，往上清液中分批加入硫酸铵至其饱和度达70％～80％，静置过夜后离心，将所得沉淀透析、浓缩、冷冻干燥，得到银杏球蛋白；

(3)将银杏球蛋白加入到去离子水中，混合均匀后得到悬浮液，加入蛋白酶进行酶解，结束后沸水浴灭酶，将得到的产物通过截留分子量为1000Da的超滤膜过滤，收集滤液并冷冻干燥，得到银杏DPP-Ⅳ抑制肽；

步骤(3)中，所述蛋白酶选自胃蛋白酶、菠萝蛋白酶或木瓜蛋白酶中的任意一种。

2.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，氯化钠溶液的质量浓度为8～12％，脱脂银杏粉和氯化钠溶液的质量体积比为1:15～1:20。

3.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述提取温度为55～60℃，提取时间为2～4h。

4.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述透析采用的是截留分子量为3500Da的透析膜，时间为48～72h。

5.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，银杏球蛋白和去离子水的质量体积比为1:15～1:20。

6.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，当蛋白酶为胃蛋白酶时，酶解条件为：酶与底物质量比1:50～1:100，酶解温度37℃，酶解pH3.0～3.5，酶解时间2.5～3.5h。

7.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，当蛋白酶为菠萝蛋白酶时，酶解条件为：酶与底物质量比1:50～1:100，酶解温度50～55℃，酶解pH6.5～7.0，酶解时间3～4h。

8.如权利要求1所述银杏DPP-Ⅳ抑制肽的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，当蛋白酶为木瓜蛋白酶时，酶解条件为：酶与底物质量比1:50～1:100，酶解温度50～55℃，酶解pH7.5～8.0，酶解时间3～4h。