[发明专利]一种抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法在审
| 申请号: | 202211287532.9 | 申请日: | 2022-10-20 |
| 公开(公告)号: | CN115838795A | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
| 发明(设计)人: | 陈翔;李捷;彭聪;刘利辉;陈旺青 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅医院 |
| 主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司: | 湖南乔熹知识产权代理事务所(普通合伙) 43262 | 代理人: | 安曼 |
| 地址: | 410008*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 组胺 药物 代谢 标志 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒采用Snapshot分型技术检测抗组胺药物的代谢标志物选自下列基因位点组合的一组或两组:
HSH2D基因位点rs4321304、ZNF804B基因位点rs1524127和/或NOTCH1基因位点rs3125003组;及
FAH基因位点rs1370275和/或NR1I3基因位点rs2502815组。
2.根据权利要求1所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述rs1524127位点的特异性扩增引物如序列表SEQ ID NO:1~2所示,单碱基延伸引物序列如序列表SEQ ID NO:3所示。
3.根据权利要求1所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述rs4321304位点的特异性扩增引物如序列表SEQ ID NO:4~5所示,单碱基延伸引物序列如序列表SEQ ID NO:6所示。
4.根据权利要求1所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述rs3125003位点的特异性扩增引物如序列表SEQ ID NO:7~8所示,单碱基延伸引物序列如序列表SEQ ID NO:9所示。
5.根据权利要求1所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述rs2502815位点的特异性扩增引物如序列表SEQ ID NO:11~11所示,单碱基延伸引物序列如序列表SEQ ID NO:12所示。
6.根据权利要求1所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒,其特征在于,所述rs1370275位点的特异性扩增引物如序列表SEQ ID NO:13~14所示,单碱基延伸引物序列如序列表SEQ ID NO:15所示。
7.一种采用根据权利要求1~6任一项所述的抗组胺药物代谢标志物的检测试剂盒的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括如下步骤:
a)取待测样本及质控品,进行PCR扩增及产物纯化;
b)向纯化后的PCR扩增产物中加入单碱基延伸反应体系,选择一组或两组进行SNaPshot PCR扩增;
c)将SNaPshot PCR扩增产物进行纯化,电泳测序。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述步骤a)中的PCR扩增程序如下:
95℃ 5分钟;95℃ 30秒,55℃ 30秒,72℃ 1分钟,44个循环;72℃ 5分钟,25℃待机保持。
9.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述步骤b)中的SNaPshot PCR扩增程序如下:
96℃ 10秒;96℃ 10秒,55℃ 5秒,60℃ 30秒,25个循环;4℃待机保持。
10.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述步骤c)中的纯化步骤具体如下:
往SNaPshot PCR产物中每孔均加入1.0μLFastAP、2μLBuffer、7μLddH2O,按以下程序进行反应:37℃ 10分钟;75℃ 5分钟;4℃待机保持。
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