[发明专利]利用人类线粒体ND6基因重组载体制备ND6蛋白及应用在审
| 申请号： | 202211227430.8 | 申请日： | 2022-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN116179597A | 公开（公告）日： | 2023-05-30 |
| 发明（设计）人： | 冀延春;王静;陈加荣;管敏鑫 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N9/02;A61K48/00;A61K38/44;A61P27/02 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 赵杭丽 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 人类 线粒体 nd6 基因 重组 载体 制备 蛋白 应用 | ||
1.利用人类线粒体ND6基因重组载体制备ND6蛋白，其特征在于，所述人类ND6基因重组载体的基因序列从N端到C端依次为CMV启动子，线粒体靶向序列COX8A-MTS和优化后的核密码子编码的人类线粒体ND6核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的利用人类线粒体ND6基因重组载体制备ND6蛋白，其特征在于，所述人类ND6基因重组载体核苷酸序列为优化后的核密码子编码的人类ND6基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，核密码子编码的ND6蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，该载体能在突变细胞中表达野生型ND6蛋白，替代突变导致的ND6异常蛋白，进而缓解m.14484TC突变导致的Leber遗传性视神经病变。
3.根据权利要求1所述的利用人类线粒体ND6基因重组载体制备ND6蛋白，其特征在于，所述核密码子编码人类ND6基因的翻译的ND6融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，所述线粒体靶向序列COX8A-MTS如SEQ ID NO:2所示，CMV启动子的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。
4.根据权利要求1-3任一所述的利用人类线粒体ND6基因重组载体制备ND6蛋白，其特征在于，所述重组载体的骨架载体为pAAV-ZsGreen质粒，其序列如SEQ ID NO:4所示，所述重组载体为pAAV-ND6质粒，其序列如SEQ ID NO:5所示。
5.权利要求1所述的人类ND6基因重组载体在制备ND6蛋白试剂盒中应用。
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