[发明专利]一种双响应型的嵌段共聚物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种双响应型的嵌段共聚物及其制备方法和应用，所述嵌段共聚物为侧链通过二硫键连接喜树碱CPT的三嵌段共聚物FA‑PEG‑GPLGVRG‑Plys。本发明在生理环境中具有良好的生物相容性以及在肿瘤微环境(MMP2和还原环境)中表现出选择性的药物快速释放和生物毒性激活，能够在体内增强免疫应答水平和提高抗肿瘤疗效，在肿瘤的化药和RNAi联用以调动化学免疫治疗方面具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物材料领域，特别涉及一种双响应型的嵌段共聚物及其制备方法和应用。

背景技术

CD47是一种膜受体蛋白，属于免疫球蛋白超家族，可以与信号调节蛋白α(SIRPα)相互作用，抑制巨噬细胞的吞噬作用。CD47参与了一系列的细胞活动，包括凋亡、增殖、黏着与迁移，而且还在免疫和血管新生响应中发挥着重要作用。CD47在人体细胞中广泛表达，并且在多种不同的癌细胞中是过表达的。因此CD47具有作为某些癌症的治疗靶点的潜力。

研究发现，通过阻断CD47/SIRPα免疫检查点，能够促进巨噬细胞迁移到肿瘤组织处，导致肿瘤相关的巨噬细胞在功能上从肿瘤促进M2样表型转变为杀伤肿瘤的M1样表型，激活对肿瘤的免疫应答，可以促进肿瘤相关巨噬细胞杀伤肿瘤。

使用抗CD47的单克隆抗体与CD47结合，从而阻断癌细胞的CD47和信号调节蛋白α(SIRPα)的相互作用的方法，来抑制肿瘤的生长和转移在治疗骨髓瘤、平滑肌肉瘤、淋巴瘤和乳腺癌中取得了一定的效果，但是由于CD47在人体细胞内的广泛表达，使用不具有靶向性的抗体，会引发一系列的安全问题，从而限制了抗体的进一步的临床推广。

PD-1(程序化死亡分子1)是免疫细胞T细胞表面的一种受体蛋白，它会与肿瘤细胞表面表达的一种蛋白PD-L1(细胞程式死亡-配体1)发生作用。PD-L1蛋白(细胞程式死亡-配体1)正是PD-1的配体，与免疫系统的抑制有关，可以传导抑制性的信号。PD-1和PD-L1一旦结合便会向T细胞传递一种负向调控信号，诱导T细胞进入静息状态，降低T细胞的增生，让其无法识别癌细胞，并且使T细胞自身增殖减少或凋亡，有效解除机体的免疫反应，因此癌细胞可以肆无忌惮地生长了。使用抗体阻断疗法(抗PD-1和PDL-1抗体，如opdivo、keytruda、tecentriq和MPDL320A)在癌症治疗方面都取得了令人满意的结果。然而，这些抗体是非特异性的，也可以与正常组织细胞上表达的PD-1或PDL-1结合，导致一定程度的副作用，如自身免疫性疾病等。

虽然，现在针对肿瘤免疫疗法有一些抗体药物已经推上了临床，而且与小分子药物相比，抗体药物可作用的靶点蛋白种类更多，且可通过蛋白质工程技术提升其亲和性降低毒性等。但是抗体类药物拥有分子结构更加复杂、生产成本更高、通常需通过注射给药等劣势，并且抗体药物通常只能与细胞膜表面或细胞外的蛋白质发挥作用，使得其应用受到一定限制。于此对比之下，核酸类药物就具有很好的优势。

核酸类药物可基于碱基互补原理对表达相关蛋白质的基因进行调节，而非与靶点蛋白质进行结合，且通过合适的递送系统可使其进入细胞内发挥作用，因此核酸药物可避免传统小分子化药和抗体类药物面临的不可成药靶点的限制问题，而且对胞内外和细胞膜蛋白均可发挥调节作用。同时，多数核酸类药物的作用基础是碱基互补配对原则，只需知道靶基因的碱基序列，核酸药物的序列设计就十分容易，化学修饰和递送系统的设计与序列的设计是相对独立的；相比之下，小分子和抗体药物的发现和优化过程中，对活性、PK/PD等性质的优化均需要对结构做改动，需要花费大量的工作。因此，核酸类药物具有其他药物不可比拟的优势，核酸药物安全高效的递送入细胞并发挥其功能，实现致病基因的长期抑制，是一种理想的治疗方案。但是核酸在体内的半衰期极短，并且核酸酶对核酸的降解效率也很高，因此需要寻求一种新的核酸类药物递送载体。

发明内容