[发明专利]一种共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法

权利要求书

1.一种共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以基础培养基单独培养一株小球藻和一株胶球藻至对数末期，收集两株微藻种子液作为共培养接种种子液；(2)优化两株微藻接种种子液接种体积比和共培养体系碳氮比，以获得的最大生物量产率为筛选指标，构建微藻共培养体系；(3)以构建的最佳共培养条件发酵扩大化共培养两株微藻获得高产率α-亚麻酸油脂。

2.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，所述的基础培养基具体为：按质量份数计，NaNO₃ 1.2-1.3份、KH₂PO₄ 1.2-1.3份、MgSO₄·7H₂O0.95-1.05份、Na₂EDTA 0.4-0.6份、H₃BO₃ 0.10-0.12份、CaCl₂ 0.82-0.86份、FeSO₄·7H₂O0.04-0.06份、ZnSO₄·7H₂O 0.03-0.05份、MnCl₂·4H₂O 0.01-0.02份、Na₂MoO₄·2H₂O 0.01-0.02份、CuSO₄·5H₂O 0.01-0.03份、CoNO₃·6H₂O 0.004-0.006份、Glucose 8-12份、蒸馏水800-1200份，培养基pH6.0-7.0；所述培养基的碳源和氮源分别为葡萄糖和硝酸钠。

3.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，所述的小球藻为原始小球藻Chlorella protothecoides，所述的胶球藻为极地胶球藻株Coccomyxa subellipsoidea C-169。

4.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，所述两株微藻接种种子液的制备为分别挑取小球藻和胶球藻平板单菌落接入基础培养基中，在光照强度50-55μmol/m²/s，摇床转速为120-160rpm，培养温度为28±1℃，光照和黑暗周期变化的条件下培养144-168h即得两株微藻接种种子液。

5.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，两株微藻接种种子液接种体积比的优化方法具体为，将两株微藻接种种子液按照不同体积比10:0-0:10同步接入基础培养基培养至对数末期，离心收集共培养藻液，蒸馏水洗涤藻泥，冷冻干燥获得藻粉，称重藻粉计算生物量产率，以最大生物量产率确定最佳接种体积比。

6.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，共培养体系碳氮比的优化方法具体为，按上述得到的两株微藻接种种子液的最佳接种体积比同步接入碳氮比为20-80的基础培养基培养至对数末期，离心收集共培养藻液，蒸馏水洗涤藻泥，冷冻干燥获得藻粉，称重藻粉计算生物量产率，以最大生物量产率确定共培养体系的最佳碳氮比。

7.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，所述的共培养体系碳氮比为葡萄糖碳源中碳质量与硝酸钠氮源中氮质量之比。

8.根据权利要求1所述的共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法，其特征在于，步骤(3)具体为，将两株微藻以最佳接种液体积比接入装有最佳碳氮比基础培养基的光生物反应器进行共培养，培养至对数末期离心收集共培养藻液，经冷冻干燥、有机溶剂抽提、皂化获得脂肪酸甲酯，以GC内标法测定α-亚麻酸油脂含量，再通过生物量产率计算α-亚麻酸油脂产率。