[发明专利]一种广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗及其制备方法在审
申请号: | 202211201198.0 | 申请日: | 2022-09-29 |
公开(公告)号: | CN116036256A | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 梅梅;王卫华;张雪花;武奇 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | A61K39/145 | 分类号: | A61K39/145;A61P31/16;C07K14/11;C12N15/44;C12N7/01;C12N15/866;C12R1/93 |
代理公司: | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人: | 袁静 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 广谱 h9 禽流感 单位 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于所述疫苗中抗原为氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的蛋白。
2.根据权利要求1所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于通过培养携带所述蛋白编码基因的重组杆状病毒制备所述疫苗抗原。
3.根据权利要求1或2所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于所述蛋白编码基因的序列如SEQ ID NO:4所示。
4.根据权利要求3所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于所述重组杆状病毒采用如下方法构建:在SEQ ID NO:4的5’端添加kozak序列,3’端添加Leu zip序列,然后插入杆状病毒转移载体pFastBac1中,得到重组杆状病毒转移质粒;将所述重组杆状病毒转移质粒转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,获得重组杆状病毒穿梭质粒;将所述重组杆状病毒穿梭质粒转染昆虫细胞Sf9,获得表达所述抗原的重组杆状病毒。
5.根据权利要求4所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于采用High Five细胞培养所述重组杆状病毒。
6.根据权利要求5所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于将所述抗原灭活,加入灭活后抗原体积3-5%的吐温-80,乳化,得到水相;将白油和司本-80按照体积比为96:3-5混合均匀,得到油相;将水相和油相按照体积比1:2.5-3.5混合、乳化,得到所述疫苗。
7.根据权利要求6所述广谱型H9亚型禽流感亚单位疫苗,其特征在于采用甲醛灭活所述抗原。
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