[发明专利]一种复合微生物制剂及其制备方法和保存方法

权利要求书

1.一种复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，其包括：将乳杆菌的种子液和肠球菌的种子液混合后发酵；发酵过程中，按3个阶段对发酵培养基中的pH进行调控：

第一阶段，调控pH为6.6～6.8；

第二阶段，调控pH为5.9～6.1；

第三阶段，调控pH为5.0～5.2；

其中，第一阶段为发酵的第0～(6～10)小时；第二阶段为发酵的第(6～10)～(14～18)小时；第三阶段为发酵的第(14～18)～(28～32)小时。

2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，第一阶段为发酵的第0～(7～9)小时，第二阶段为发酵的第(7～9)～(15～17)小时，第三阶段为发酵的第(15～17)～(29～31)小时；优选地，第一阶段为发酵的第0～8小时，第二阶段为发酵的第8～16小时，第三阶段为发酵的第16～30小时；

优选地，所述制备方法包括采用pH调控剂对发酵培养基中的pH进行调控；

优选地，所述pH调控剂包括：体积分数为1％～20％的氢氧化钠和/或体积分数为1％～20％的盐酸。

3.根据权利要求1或2所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述乳杆菌的种子液和所述肠球菌的种子液的活菌数比为：(0.5～2)：(0.5～2)；

优选地，所述乳杆菌选自鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的至少一种；所述肠球菌包括粪肠球菌和屎肠球菌中的至少一种；

优选地，所述发酵的条件包括：36～38℃，转速为40～50rpm，不通气；

优选地，所述发酵培养基的初始pH为7.0～7.2。

4.根据权利要求3所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，按重量分数计，所述发酵采用的发酵培养基包括以下组分：葡萄糖2％～2.4％，麦芽糖1％～1.2％，麸皮1％～1.2％，蛋白胨1％～1.2％，酵母浸粉1％～1.2％，乙酸钠0.5％～0.6％，一水硫酸镁0.02％～0.24％，一水硫酸锰0.02％～0.24％，磷酸氢二钾0.2％～0.24％和余量水。

5.根据权利要求1或2所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括对发酵后的菌液进行过滤；

优选地，所述过滤的步骤包括：将所述发酵后的菌液经振荡筛过滤，得到的滤液与水按体积比为(1～3)：(1～3)混合，然后经陶瓷膜过滤器浓缩至与原菌液相同的体积。

6.一种复合微生物制剂，其特征在于，其由权利要求1～5任一项所述的复合微生物制剂制备获得。

7.一种复合微生物制剂的试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求6所述的复合微生物制剂。

8.一种复合微生物制剂的保存试剂，其特征在于，按重量份数计，所述保存试剂的主要成分包括：葡萄糖0.5～0.6份、玉米淀粉2～2.4份、抗坏血酸钠0.2～0.24份、七水硫酸亚铁0.48～0.5份、磷酸氢二钾0.4～0.48份、磷酸二氢钾0.08～0.1份、亚麻酸4～4.8份、单油酸甘油酯0.5～0.6份、羧甲基壳聚糖0.4～0.5份和氯化钠0.85～0.9份。

9.一种复合微生物制剂，其特征在于，其包括：权利要求6所述的复合微生物制剂和权利要求8所述的复合微生物制剂的保存试剂；

优选地，复合微生物制剂和保存试剂的质量比为100：(1～30)；

优选地，复合微生物制剂和保存试剂的质量比为100：(11.56～15.12)。

10.一种复合微生物制剂的保存方法，其特征在于，其包括：将权利要求6所述的复合微生物制剂与权利要求8所述的复合微生物制剂的保存试剂混合；

优选地，复合微生物制剂和保存试剂的质量比为100：(1～30)；

优选地，复合微生物制剂和保存试剂的质量比为100：(11.56～15.12)。