[发明专利]一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法

说明书

本发明公开了一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，涉及生物技术领域，该方法包括：将甜瓜蔓枯病病原菌接种于液体培养基中，培养得到所述甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子；其中，所述液体培养基中含有黄腐酸钾。本发明改变了培养甜瓜蔓枯病病原菌的PD液体培养基中葡萄糖的含量，并确定了最佳的葡萄糖用量，在此基础上，还在PD液体培养基中添加了黄腐酸钾，优化了培养温度，通过观测甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生量，证明本发明的方法可以有效提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率和产孢量。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法。

背景技术

甜瓜蔓枯病是甜瓜栽培中常见的土传病害之一，主要危害叶片和茎蔓，发生严重时，导致植株死亡，减产严重。在甜瓜抗蔓枯病研究中，诱导甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生是甜瓜蔓枯病回接试验和育种材料抗性接种鉴定试验中的关键点。在大量的研究中发现，甜瓜蔓枯病病原菌的不同类型菌株产生分生孢子的差异较大，且相较于其他病原菌，甜瓜蔓枯病病原菌不易产生分生孢子，这在一定程度上增加了对甜瓜抗蔓枯病研究的难度。前人研究中，诱导甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生采用的主要方法包括暗培养和紫外间歇照射对分生孢子的产孢诱导法、菌落培养法(即利用平板上培养甜瓜蔓枯病病原菌菌落，用蒸馏水冲洗分生孢子)和活体产孢法(即利用黄瓜活体培养甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子)。暗培养和紫外间歇照射这种诱导产孢方法为了获得量大的甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子，还会在培养甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子的液体培养基中加入稀酸或乳酸进行调节，虽然能够产生大量的分生孢子，但其试验操作过程要求更为严格和复杂；菌落培养法和活体产孢法难以满足大规模抗病回接鉴定试验或育种材料抗性接种鉴定试验的需要。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明的方法可以有效提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率和产孢量。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，包括：将甜瓜蔓枯病病原菌接种于液体培养基中，培养得到所述甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子；其中，所述液体培养基中含有黄腐酸钾。

进一步地，所述黄腐酸钾在所述液体培养基中的含量为0.1g/L。

进一步地，所述液体培养基的配方具体为：土豆200g，葡萄糖10g，黄腐酸钾0.1g，蒸馏水1000mL，pH值自然。

进一步地，所述培养的温度为28℃。

进一步地，所述培养的转速为180r/min。

进一步地，所述黄腐酸钾为黄腐酸钾。

本发明还提供黄腐酸钾在提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率或产孢量中的应用。

进一步地，所述黄腐酸钾为黄腐酸钾。

本发明还提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的培养基，所述培养基包含黄腐酸钾。

进一步地，所述黄腐酸钾在所述培养基中的添加量为0.1g/L。

本发明公开了以下技术效果：