[发明专利]一种生物碱类抗氧化剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种生物碱类抗氧化剂及其制备方法和应用，属于生物碱类化合物提取技术领域。具体的制备方法为：将宽叶独行菜全草用乙醇加热回流提取，得到粗提物；之后用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相高压液相制备色谱分离、反相制备柱纯化，得到所述生物碱类抗氧化剂。本发明分离制备的生物碱类抗氧化剂具有显著的总抗氧化能力。而且，本发明原料宽叶独行菜来源广泛，乙醇加热回流提取等方法均可实现规模化操作，且高压液相制备色谱分离可以保证产品的纯度大于98％。

技术领域

本发明属于生物碱类化合物提取技术领域，具体涉及一种生物碱类抗氧化剂及其制备方法和应用。

背景技术

氧化应激(Oxidative Stress，OS)，是指体内氧化与抗氧化作用失衡的一种状态，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素。

宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.)，为十字花科(Brassicaceae)独行菜属(Lepidium)植物，又称大辣、辣辣根、止痢草。宽叶独行菜生于田边、地埂、沟边、河谷，分布于甘肃、青海、宁夏等地，分布广泛，资源丰富，具有一定的开发和利用价值。《中国沙漠地区药用植物》中记载，宽叶独行菜具有清热燥湿，治菌痢，肠炎的作用。现代药物研究表明，宽叶独行菜还具有一定的抗氧化、抗衰老作用，因此从宽叶独行菜中分离鉴定抗氧化剂并将其应用于抗氧化、抗衰老以及相关药物合成方面具有重要的应用价值。

发明内容

为解决现有技术中的上述问题，本发明提供了一种生物碱类抗氧化剂及其制备方法和应用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明技术方案之一：一种生物碱类抗氧化剂，分子式为C₁₆H₁₂N₂O₂，结构式为：

本发明技术方案之二：所述一种生物碱类抗氧化剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将宽叶独行菜用乙醇回流提取，之后将提取液浓缩，得到粗提物；

(2)将步骤(1)得到的粗提物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，并将萃取液浓缩，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位；

(3)将步骤(2)得到的正丁醇部位利用正相硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇混合流动相梯度洗脱，并将洗脱液浓缩、干燥，依次得到组分Fr.1～Fr.4；

(4)将步骤(3)得到的组分Fr.4利用微孔树脂开放柱色谱进行分离，用甲醇-水混合流动相梯度洗脱，并将洗脱液浓缩，依次得到组分Fr.4-1～Fr.4-10；

(5)将步骤(4)得到的组分Fr.4-2利用反相高压液相色谱柱进行分离，用甲酸溶液-乙腈混合流动相洗脱，洗脱液经紫外检测器检测，收集色谱峰馏分，干燥，得到组分Fr.4-2-1；

(6)将步骤(5)得到的组分Fr.4-2-1利用反相制备柱进行纯化，用甲酸溶液-乙腈混合流动相洗脱，洗脱液经紫外检测器检测，收集色谱峰馏分，干燥，得到组分Fr.4-2-1-2，即为所述生物碱类抗氧化剂。

进一步地，步骤(1)中，所述宽叶独行菜为宽叶独行菜粉末，具体的制备方法为将宽叶独行菜全草阴干，粉碎后过40目筛。

进一步地，步骤(1)中，所述乙醇的体积分数为95％，所述宽叶独行菜与所述乙醇的料液比为1kg：(5～50)L；所述回流提取的温度为70℃，时间为2～4h，次数为2～4次；所述浓缩的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。