[发明专利]一种生物碱类抗氧化剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种生物碱类抗氧化剂，其特征在于，分子式为C₁₆H₁₂N₂O₂，结构式为：

2.一种权利要求1所述一种生物碱类抗氧化剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将宽叶独行菜用乙醇回流提取，之后将提取液浓缩，得到粗提物；

(2)将步骤(1)得到的粗提物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，并将萃取液浓缩，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位；

(3)将步骤(2)得到的正丁醇部位利用正相硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇混合流动相梯度洗脱，并将洗脱液浓缩、干燥，依次得到组分Fr.1～Fr.4；

(4)将步骤(3)得到的组分Fr.4利用微孔树脂开放柱色谱进行分离，用甲醇-水混合流动相梯度洗脱，并将洗脱液浓缩，依次得到组分Fr.4-1～Fr.4-10；

(5)将步骤(4)得到的组分Fr.4-2利用反相高压液相色谱柱进行分离，用甲酸溶液-乙腈混合流动相洗脱，洗脱液经紫外检测器检测，收集色谱峰馏分，干燥，得到组分Fr.4-2-1；

(6)将步骤(5)得到的组分Fr.4-2-1利用反相制备柱进行纯化，用甲酸溶液-乙腈混合流动相洗脱，洗脱液经紫外检测器检测，收集色谱峰馏分，干燥，得到组分Fr.4-2-1-2，即为所述生物碱类抗氧化剂。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述宽叶独行菜为宽叶独行菜粉末，具体的制备方法为将宽叶独行菜全草阴干，粉碎后过40目筛。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述乙醇的体积分数为95％，所述宽叶独行菜与所述乙醇的料液比为1kg：(5～50)L；所述回流提取的温度为70℃，时间为2～4h，次数为2～4次；所述浓缩的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述粗提物与所述石油醚、乙酸乙酯或正丁醇的体积比为1：1；所述萃取的次数为2～4次；所述浓缩的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述正相硅胶柱色谱分离前还需将正丁醇部位用200～300目硅胶拌样，所述正丁醇部位与硅胶的料液比为1g：1～3mL；所述二氯甲烷-甲醇混合流动相梯度洗脱中二氯甲烷与甲醇的体积比依次为15：1、10：1、5：1、1：1；所述干燥的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述微孔树脂开放柱色谱的固定相为MCI微孔树脂；所述利用微孔树脂开放柱色谱进行分离前还需将组分Fr.4溶于水中，并过0.45微米微孔滤膜，所述Fr.4与水的质量体积比为1：1；所述甲醇-水混合流动相梯度洗脱中甲醇的体积比依次为0、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％；所述浓缩的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述反相高压液相色谱柱柱长为250mm，直径为20mm，固定相为5μm的Dubhe C18；所述甲酸溶液-乙腈混合流动相中乙腈的体积分数为14％，所述甲酸溶液中甲酸的体积分数为0.2％；所述洗脱时间为55min，所述洗脱流速为19mL/min；所述紫外检测器的波长为254nm；所述干燥的真空度为0.07～0.09MPa，温度为50～60℃。