[发明专利]一种检测SRY基因的物质及对猪、山羊、牛进行性别鉴定的PCR检测方法

权利要求书

1.一种检测SRY基因的物质，其特征在于，用于对猪、山羊、牛进行性别鉴定的产品中，检测SRY基因的物质为检测SRY基因的通用引物，检测SRY基因的通用引物包含上游引物SRY-F、下游引物SRY-R，上游引物SRY-F的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：5′-TGCTTCTGCTATGTTCAG-3′；下游引物SRY-R的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，具体为：5′-GTTCATGGGTCGCTTGAC-3′。

2.一种对猪、山羊、牛进行性别鉴定的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1中检测SRY基因的物质。

3.根据权利要求2所述的对猪、山羊、牛进行性别鉴定的试剂盒，其特征在于：试剂盒中还包括PCR反应试剂和DNA提取试剂。

4.一种对猪、山羊、牛进行性别鉴定的PCR检测方法，采用权利要求2至3任一所述的试剂盒，其特征在于：包括下述步骤：

1)分别提取待测样品基因组DNA，通过1.5％琼脂糖凝胶电泳对提取的DNA样品进行检测，确定DNA的完整性和质量，备用；

2)以提取的基因组DNA为PCR扩增模板，利用权利要求1中所述的检测物质进行PCR扩增反应；

3)PCR扩增结束后，通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测，判定方法为：能够扩增出187bp目的片段的样本为公家畜DNA，无目的片段扩增的样本为母家畜DNA。

5.根据权利要求4所述的对猪、山羊、牛进行性别鉴定的PCR检测方法，其特征在于：步骤1)中的待测样本选自毛发、早期胚胎、血液、组织或器官；步骤2)中PCR反应体系包含：样品DNA(100ng/μL)1μL，2×Taq MasterMix 12.5μL，上游引物SRY-F(10μmol/L)1μL，下游引物SRY-R(10μmol/L)1μL，去离子水9.5μL；优选的，步骤1)中的PCR扩增条件为：94℃预热4min；94℃变性45s，53℃退火45s，72℃延伸20s，35个循环；72℃延伸10min。