[发明专利]一种含有MSC细胞的制剂

说明书

本申请属于细胞制剂领域，涉及一种含有MSC细胞的制剂，包括来源于脐带的MSC细胞和来源于脐带的内皮祖细胞；其中，MSC细胞的浓度是0.1×10⁶‑12×10⁶细胞/ml，并且所述MSC细胞的含量≥90%，内皮祖细胞的含量≤10%。该技术方案是从MSC细胞的培养过程实现对MSC细胞最优性能的保持，继而实现获得的MSC细胞制剂具有好的稳定性能。

技术领域

本发明属于细胞制剂领域，涉及一种含有MSC细胞的制剂。

背景技术

MSC细胞(MSC，mesenchymal stem cells)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，属于多能干细胞。

MSC细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。

大量研究表明MSC在用于心血管疾病、肝硬化、骨和肌肉衰退性疾病、脑和骨髓神经损伤、老年痴呆以及红斑狼疮和硬皮病等自身免疫性疾病的治疗方面具有重大作用；并在美容、保健、抗衰老等方面有巨大的发展前景。如中国专利CN104136034B间充质基质细胞及其相关用途、CN102008507B人脐带MSC细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法……

但现有技术总结的MSC制剂在输入治疗后，会有不良反应，如发烧，文献中的最高发生率大概为39%；分析原因主要是人类 MSC (hMSC) 的确切特性可能会因多种参数（包括组织来源、分离方法和培养基成分）而有很大差异【文献1】。

人脐静脉内皮祖细胞分离自脐带组织；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。

文献1：Isolation, cultivation, and characterization of humanmesenchymal stem cells. Mushahary D, Spittler A, Kasper C, Weber V, CharwatV. Cytometry A. 2018 Jan;93(1):19-31.。

发明内容

本申请基于现状提供一种含有MSC细胞的制剂，从MSC细胞的培养过程中，避免动物源性成份的引入；同时，调控脐带获取MSC过程中携带内皮祖细胞的含量，实现对MSC细胞最优性能的保持；最终，本申请获得的含有MSC细胞的制剂成份简单明确，无毒副作用，且具有好的稳定性能。

为实现上述技术目的，本申请采取的技术方案为，一种含有MSC细胞的制剂，所述制剂包括来源于脐带的MSC细胞和来源于脐带的内皮祖细胞；其中，所述制剂中MSC细胞的浓度是0.1×10⁶-12×10⁶细胞/ml；所述MSC细胞的含量≥90%，且所述内皮祖细胞的含量≤10%。

作为本申请改进的技术方案，所述MSC细胞的浓度是0.6×10⁶-4×10⁶细胞/ml。

作为本申请改进的技术方案，所述MSC细胞的含量≥95%，且所述内皮祖细胞的含量≤5%。

作为本申请改进的技术方案，所述制剂还包括注射液，所述来源于脐带的MSC细胞与来源于脐带的内皮祖细胞均悬浮于注射液中。

作为本申请改进的技术方案，在用于静脉注射时，所述注射液包括生理盐水、复方电解质注射液或右旋糖酐40葡萄糖注射液。

作为本申请改进的技术方案，在用于局部关节腔注射时，所述注射液包括生理盐水、复方电解质注射液或透明质酸注射液。

作为本申请改进的技术方案，所述含有MSC细胞的制剂中的细胞是对脐带组织采用组织块贴壁法分离获得，并采用无动物源性的重组细胞解离酶消化，并采用DPBS中和后进行传代培养获得。