[发明专利]腈水解酶突变体及其应用在审
| 申请号： | 202211090097.0 | 申请日： | 2022-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN116426511A | 公开（公告）日： | 2023-07-14 |
| 发明（设计）人： | 吴坚平;杨丽媛;张红玉;徐刚;杨立荣 | 申请（专利权）人： | 浙江大学杭州国际科创中心 |
| 主分类号： | C12N9/78 | 分类号： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州知闲专利代理事务所(特殊普通合伙) 33315 | 代理人： | 万静 |
| 地址： | 311200 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水解 突变体 及其 应用 | ||
1.腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体由NCBI登录号为Q03217.2的野生型腈水解酶突变所得，具体为以下突变中的一种，各突变位点及其突变前后的氨基酸单字母简写如下所示：T171P；T173E；N146D；T225A；T171P/T173E；T171P/T173V；T171P/T173Q；T171P/S188G；T171P/T173E/H181F；T171P/T173E/H181G；T171P/T173V/H181F；T171P/T173V/H181G；T171P/T173Q/H181F；T171P/T173Q/H181G；T171P/T173Q/S188G；T171P/H181G/S188G；T171P/T173E/H181F/S188G；T171P/T173E/H181F/N146D；T171P/T173E/H181F/T225A；N146D/T171P/T173E/H181F/T225A。
2.一种如权利要求1所述的腈水解酶突变体的编码基因。
3.一种包含权利要求2所述的编码基因的表达载体。
4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，原始表达载体为pET-28a质粒。
5.一种包含权利要求2所述的编码基因的基因工程菌。
6.如权利要求1所述的腈水解酶突变体、如权利要求2所述的编码基因或权利要求5所述的基因工程菌在合成对甲氧基苯甲酸和/或间氯苯甲酸中的应用。
7.一种合成对甲氧基苯甲酸或间氯苯甲酸的方法，其特征在于，包括：在有机溶剂中，以对甲氧基苯腈或间氯苯腈为底物，利用催化剂生物催化合成对甲氧基苯甲酸或间氯苯甲酸；
所述催化剂为如权利要求1所述的腈水解酶突变体或者如权利要求5所述的基因工程菌。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，催化反应体系中，反应的温度为25℃-40℃，pH为7.0-8.0。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲醇或乙醇，有机溶剂的添加量≤反应体系总体积的10％。
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