[发明专利]一种靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体及其用途

说明书

本发明公开了一种靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体及其用途，所述嵌合抗原受体包含针对CD123的纳米抗体VHH01和针对CD7的纳米抗体VHH10，本发明还提供了一种同时靶向CD123和CD7的通用型CAR‑T细胞，经实验验证发现，所述CAR‑T细胞对肿瘤细胞具有显著的杀伤作用，本发明提供的通用型CAR‑T细胞产品在使用中不受病人自身病情或治疗方式的影响，可以随时制备，在最佳的时机给予治疗，确保治疗的有效性，具有较好的临床应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地，本发明涉及一种靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体及其用途。

背景技术

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法已经成为一种新型的免疫疗法，对一些血液系统恶性肿瘤的长期疾病控制具有巨大的潜力，这在一定程度上也进一步促进了CAR-T细胞治疗血液系统恶性肿瘤的发展。在几种CAR-T细胞疗法中，靶向CD123分子的CAR-T细胞应用较为广泛，尤其是治疗急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia，AML)等血液系统肿瘤。CD123蛋白的基因名称为IL3RA。CD123的高表达与信号转导及转录激活因子5(STAT5)信号通路的活化相关，STAT5激活通路参与在多种恶性血液病中，CD123主要在造血系统中表达，CD123在正常CD34+CD38-细胞中低表达或不表达。此外，正常情况下在髓系祖细胞、B淋巴祖细胞中CD123有较高表达，而红系祖细胞和多向分化潜能祖细胞中低表达或不表达。相关研究表明，CD123在60％-90％以上的AML原始细胞中高表达。但是靶向CD123的CAR-T细胞的疗效仍然较低，可能是由于髓系肿瘤细胞形成的特殊的免疫抑制环境导致CAR-T细胞在体内不能有效扩增。

CD7分子是一个分子量约40kDa细胞表面糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族中的一员。CD7分子主要表达在大多数的胸腺细胞表面、85％以上的外周血T淋巴细胞表面以及自然杀伤细胞表面。尽管目前的研究表明CD7分子的具体功能还不太清楚，但实验研究显示CD7缺陷的鼠T淋巴细胞对刺激反应正常以及当抗体与人T淋巴细胞上的CD7分子结合后对细胞的生长和增殖并没有影响。同时，CD7分子的一个重要性质是当其和抗体结合后会快速发生内吞作用。已有研究表明靶向CD7的CAR-T细胞在CD7+的T细胞来源的恶性肿瘤治疗中临床疗效和安全性获得验证；同时，大约1/3的AML患者的肿瘤细胞也表达CD7抗原，已有病例证实CD7 CAR-细胞回输给CD7+的AML患者后，在体内可以获得高效扩增，并且能极高效的清除CD7+的AML细胞。

与传统抗体相比，纳米抗体具有相对分子质量小、亲和力高、稳定性高、溶解性好、免疫原性低、穿透力强、人源化简单等优势。基于纳米抗体的特性以及羊驼天然重链抗体的VHH单域抗体的特殊结构，使其在基础医学研究以及疾病诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。

目前，尚未见同时靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体的相关报道，更没有同时靶向CD123和CD7的CAR-T细胞在治疗AML中的应用，鉴于此，本发明开发了同时靶向CD7和CD123的双特异性纳米CAR，经实验验证发现所述同时靶向CD7和CD123的双特异性CAR-T细胞对CD7+及CD123+的肿瘤细胞具有高效清除的作用，临床应用前景广阔。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体，为本领域提供一种全新的CD123和/或CD7相关疾病治疗的研究策略。

本发明的上述目的通过以下技术方案得以实现：

本发明的第一方面提供了一种靶向CD123和CD7的嵌合抗原受体。

进一步，所述嵌合抗原受体包括与CD123特异性结合的纳米抗体VHH01和与CD7特异性结合的纳米抗体VHH10；