[发明专利]基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法

说明书

本发明涉及一种基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法，具体包括以下步骤：S1稀释抗原：将已知纯度和浓度的抗原用基质进行梯度稀释，获得一系列不同浓度的梯度稀释液；S2抗原、抗体孵育反应：向所述步骤S1获得的每个不同浓度的梯度稀释液中分别加入等量的抗体标准品或含有抗体的样品，反应生成混合液；S3抗原中和当量的确定：向所述步骤S2获得的每个混合液中加入与所述步骤S1中抗原相对应的特异性抗原检测试剂进行检测，记录数据，从而确定抗原中和当量。利用抗原检测试剂确定抗原中和当量，并通过抗原中和当量和抗体的滴度来给抗体赋值，可以用于企业标准品甚至国家标准品的制备。

本申请是申请号为“202111629284.7”，申请日为“2021年12月28日”，发明名称为“基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法”中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，尤其涉及一种抗基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法。

背景技术

体外诊断(In Vitro Diagnosis,IVD)医疗器械是通过对人体的样品(血液、体液、组织等)进行检测而获取临床诊断信息的产品，包括试剂、校准品、控制物质、设备或系统。诊断试剂是检测患者是否患病和病情程度的基本工具之一，其结果是否准确直接影响到医生的诊断以及患者的身体健康和生命安全。而随着现代医学科技的进步，对于医学检验的结果提出了更加精准的要求，从而对体外诊断产品的质量要求也越来越高。

标准物质(如国际标准、国家标准、企业标准和临床应用的校准品等)的制备及其量值溯源是获得精准测定结果的前提条件。由于抗体的储存稳定性差，即使深低温保存亦会随着保存时间的延长，而活性逐渐降低；而且，抗体的活性多用相对的稀释滴度表示，很难客观精准量化。因此，各种抗体的标准品或参考物质的制备十分困难。目前国内外均缺乏有关抗体标准品的商品供应，给抗体检测试剂的生产和应用带来了许多难以克服的困难。

另一方面，抗体检测试剂的一个重要的性能参数是检出限。检出限是指生物样品按照分析方法的要求进行处理并检测，能区分于噪声的以特定置信水平报告被测量存在的最低值，它也被用来指最小可检测浓度，可见检出限也是一个量化指标。由于缺乏抗体的标准品，抗体检测试剂的最低检出限也无从精准确定。

中国专利文献CN113125756A中，公开了一种抗体标准品赋值和抗原中和当量确定的方法，具体包括以下步骤：S1抗体标准品或样品的抗原中和当量的确定：将已知纯度和浓度的抗原用基质进行梯度稀释，向每个不同浓度的梯度稀释液中分别加入等量的抗体标准品或含有抗体的样品，反应后，用第一抗体检测试剂对每个混合液进行抗体检测确定抗体标准品或样品的抗原中和当量；其中一定体积中抗体标准品或样品中抗体的抗原中和当量的计量单位以其中抗体可中和抗原的质量-体积浓度表示，为了特别明确质量-体积单位中的质量数是相应中和抗原的量，故而在质量单位后面加上“NAE”如：1ng NAE/mL、1μg NAE/mL、 1mg NAE/mL等。该技术方案中采用的是抗体检测试剂进行抗原中和当量的确定，但有的抗体检测试剂在使用过程中经过一段时间其效价会改变，影响检测结果，而抗原相对比较稳定，不会出现这个问题，因此需要开发一种基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法，此方法使用抗原检测试剂确定抗原中和当量，抗原中和当量确定后，还可以再次使用对抗体进行定量，同时能解决目前市面上抗体检测试剂最低检出限不能定值或定值不准确的问题。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：该基于抗原检测试剂的抗原中和当量的确定方法，具体包括以下步骤：

S1稀释抗原：将已知纯度和浓度的抗原用基质进行梯度稀释，获得一系列不同浓度的梯度稀释液；

S2抗原、抗体孵育反应：向所述步骤S1获得的每个不同浓度的梯度稀释液中分别加入等量的抗体标准品或含有抗体的样品，反应生成混合液；