[发明专利]一种抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂，其特征在于：包括抗体、脂质膜材和仿生细胞膜。

2.根据权利要求1所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂，其特征在于：所述抗体为依洛尤单抗；所述脂质膜材包括大豆卵磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000-NH2；所述仿生细胞膜为巨噬细胞膜。

3.一种如权利要求2所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、制备仿生细胞膜；

S2、采用逆向蒸发法制备抑制PCSK9的纳米脂质体：定量称取大豆卵磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000-NH2混合溶于氯仿、乙醚和超纯水混合液中；将依洛尤单抗加到类脂溶液中，水浴超声，形成W/O型乳液；将所得乳液置于旋转蒸发仪中减压蒸发除去有机溶剂，达胶态后，加入水合介质，继续减压蒸馏除去剩余的有机溶剂；旋转水合至瓶壁凝胶脱落，过0.22μm微孔滤膜，得到抑制PCSK9的纳米脂质体；采用透析法分离未包载的游离抗体；

S3、将抑制PCSK9的纳米脂质体溶液与仿生细胞膜的PBS溶液混合后搅拌得到所述抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂。

4.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：S1中，所述仿生细胞膜的具体制备过程为：当细胞培养皿中的RAW264.7细胞长满后，用细胞刮刀将细胞刮下后离心；收集的细胞在4℃下用PBS(pH7.4)洗涤2遍，然后悬浮在含有PMSF(1mM)的膜蛋白提取剂A中；混合物在冰浴中裂解30-60min，4℃水浴超声10-15min；37℃和-80℃反复冻融4次，每次20-30min；然后离心取上清液，继续离心得到巨噬细胞膜。

5.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：所述卵磷脂与所述抗体的质量比为1-5:1；所述卵磷脂与所述DSPE-PEG2000-NH2的质量比为10-20:6。

6.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：所述水合介质为含2％吐温-80的磷酸缓冲液。

7.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：所述透析是使用截留分子量为200-300kDa的透析袋透析24-72h。

8.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：所述卵磷脂和巨噬细胞膜的质量比为10:1；所述搅拌转速为800-1000rpm，时间为1-2小时。

9.根据权利要求3所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的制备方法、应用，其特征在于：S2中，所述的抑制PCSK9的纳米脂质体的平均粒径为160-180nm；抑制PCSK9的纳米脂质体对抗体活性成分的包封率为：90％。

10.一种如权利要求1-9任意一所述的抑制PCSK9的仿生纳米脂质体制剂的应用，其特征在于：用于制备预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物。