[发明专利]WAS致病突变基因及在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂盒中的应用

说明书

本发明涉及基因诊断技术领域，特别是涉及WAS致病突变基因及在制备Wiskott‑Aldrich综合征诊断试剂盒中的应用。本发明通过外显子组测序技术首次发现了c.230AG或c.238delC位点突变可以导致Wiskott‑Aldrich综合征(MIM301000)，以上述突变基因为靶点制备的诊断试剂或试剂盒，可以特异性区分Wiskott‑Aldrich综合征患者、携带者和正常人群，可用于快速、有效地预测或诊断Wiskott‑Aldrich综合征，可以提供优生优育和治疗干预指导。另一方面，本发明提供的WAS致病突变基因可以为Wiskott‑Aldrich综合征的药物筛选、药效评价及靶向治疗提供新的技术支持。

技术领域

本发明涉及基因诊断技术领域，特别是涉及WAS致病突变基因及在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂盒中的应用。

背景技术

Wiskott-Aldrich综合征(WAS，MIM 301000)，是一种X连锁隐性遗传性疾病，以血小板减少伴血小板体积减小、湿疹、免疫缺陷三联征为主要表现，同时患者易患自身免疫性疾病和淋巴瘤。如不经造血干细胞移植，WAS蛋白表达阴性患者平均生存期仅15岁左右。目前WAS的估计发病率约1/100000活产儿，该病几乎只影响男性，北美地区发病率为1/250000活产男婴。

Wiskott-Aldrich综合征致病基因WAS(MIM 300392)定位于染色体Xp11.23-p11.22，基因全长7.6kb，包含12个外显子和11个内含子，编码502个氨基酸组成的的WAS蛋白(WASp)。WASp通过发夹状结构呈非活化状态。多种信号可活化WASp，打开发夹结构，促进下游肌动蛋白的多聚化和细胞骨架重塑。WASp是一种造血系统特异表达的细胞内信号传导分子和骨架蛋白，调节肌动蛋白多聚化，促进细胞骨架及免疫突触形成。目前已有超过300种WAS基因致病突变报道。错义突变是最常见的突变类型，其次为拼接位点突变、缺失突变、无义突变、插入突变和复合突变。大多数错义突变位于第1～4外显子，拼接位点突变多位于第6～10内含子，无义突变和插入/缺失、复合突变分布于整个WAS基因。

基因突变是导致疾病发生发展的重要遗传基础，基因诊断是确诊Wiskott-Aldrich综合征的金标准。临床上需要针对不同突变建立相应的检测技术并用于明确病因和疾病诊断。但目前并没有能特异性区分Wiskott-Aldrich综合征患者、携带者和正常人群的诊断试剂盒的报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了WAS致病突变基因及在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂盒中的应用。利用本发明提供的WAS致病突变基因制备的诊断试剂盒，可以助力Wiskott-Aldrich综合征基因突变的筛查和诊断，可以特异性区分Wiskott-Aldrich综合征患者、携带者和正常人群。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种WAS致病突变基因，所述WAS致病突变基因包括c.230AG和/或c.238delC；

所述c.230AG在登录号为NM_000377.3的2号外显子的第230位存在AG突变；

所述c.238delC在登录号为NM_000377.3的2号外显子的第238位存在C缺失突变。

本发明还提供了扩增上述WAS致病突变基因的引物对，所述引物对包括WAS-1F和WAS-1R；

所述WAS-1F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述WAS-1R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了利用上述WAS致病突变基因或上述的引物对在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂或试剂盒中的应用。