[发明专利]WAS致病突变基因及在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂盒中的应用在审
| 申请号： | 202211039534.6 | 申请日： | 2022-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN115927585A | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 曾桥;伊宁;罗娇娇;刘鑫林 | 申请（专利权）人： | 湖南家辉生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12N15/11;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 苏士莹 |
| 地址： | 410205 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | was 致病 突变 基因 制备 wiskott aldrich 综合征 诊断 试剂盒 中的 应用 | ||
1.一种WAS致病突变基因，其特征在于，所述WAS致病突变基因包括c.230AG和/或c.238delC；
所述c.230AG在登录号为NM_000377.3的2号外显子的第230位存在AG突变；
所述c.238delC在登录号为NM_000377.3的2号外显子的第238位存在C缺失突变。
2.扩增权利要求1所述WAS致病突变基因的引物对，其特征在于，所述引物对包括WAS-1F和WAS-1R；
所述WAS-1F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述WAS-1R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.利用权利要求1所述WAS致病突变基因或权利要求2所述的引物对在制备Wiskott-Aldrich综合征诊断试剂或试剂盒中的应用。
4.一种Wiskott-Aldrich综合征的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒包括权利要求2所述的引物对。
5.根据权利要求4所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包括测序引物；所述测序引物包括WAS-Seq1F和WAS-Seq1R；
所述WAS-Seq1F的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述WAS-Seq1R的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
6.根据权利要求4或5所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包括c.230AG位点阳性突变参考品DNA1和c.238delC位点阳性突变参考品DNA2；
所述DNA1的单链核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
所述DNA2的单链核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
7.一种鉴定权利要求1所述WAS致病突变基因的基因型的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
以待测样品DNA为模板，利用权利要求2所述引物对进行PCR扩增，得到扩增产物；
将扩增产物进行测序，确定WAS致病突变基因的基因型。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系以20μL计，包括10×PCR缓冲液2μL、dNTPs0.4μL、WAS-1F0.5μL、WAS-1R0.5μL、模板1μL、Taq酶0.2μL和余量的ddH2O。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应进程包括：95℃预变性5min；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸60s，30个循环；72℃反应7min。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述待测样品包括血液。
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