[发明专利]基因编辑系统在制备SLC13A1基因突变低硫酸盐血症模型猪核移植供体细胞中的应用

权利要求书

1.一种试剂盒，包括SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和NCN蛋白；

所述SLC13A1-gRNA1为sgRNA，其靶序列结合区如SEQ ID NO：16中第3-22位核苷酸所示；所述SLC13A1-gRNA2为sgRNA，其靶序列结合区如SEQ ID NO：17中第3-22位核苷酸所示；所述NCN蛋白为Cas9蛋白或具有Cas9蛋白的融合蛋白；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

2.一种试剂盒，包括SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和PRONCN蛋白；

SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；

SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；

所述PRONCN蛋白自上游至下游依次包括如下元件：信号肽、分子伴侣蛋白、蛋白标签、蛋白酶酶切位点、核定位信号、Cas9蛋白、核定位信号；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

3.一种试剂盒，包括SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和特异质粒；

SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；

SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；

所述特异质粒自上游至下游依次包括如下元件：启动子、操纵子、核糖体结合位点、PRONCN蛋白的编码基因、终止子；所述PRONCN蛋白自上游至下游依次包括如下元件：信号肽、分子伴侣蛋白、蛋白标签、蛋白酶酶切位点、核定位信号、Cas9蛋白、核定位信号；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

4.SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和NCN蛋白在制备试剂盒中的应用；

SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；NCN蛋白为权利要求1中所述的NCN蛋白；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

5.SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和PRONCN蛋白在制备试剂盒中的应用；

SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；PRONCN蛋白为权利要求2中所述的PRONCN蛋白；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

6.SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和特异质粒在制备试剂盒中的应用；

SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；特异质粒为权利要求3中所述的特异质粒；

所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c)：(a)制备重组猪细胞；(b)制备模型猪；(c)制备细胞模型或组织模型或器官模型。

7.一种制备重组猪细胞的方法，包括如下步骤：将SLC13A1-gRNA1、SLC13A1-gRNA2和NCN蛋白共转染猪细胞，得到重组猪细胞；SLC13A1-gRNA1为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA1；SLC13A1-gRNA2为权利要求1中所述的SLC13A1-gRNA2；NCN蛋白为权利要求1中所述的NCN蛋白。