[发明专利]一种制备型液相色谱馏分收集装置及方法

说明书

本发明公开了一种制备型液相色谱馏分收集装置及方法，检测部分采用二极管阵列检测器光谱信号作为收集判断依据，通过光谱相似度、峰纯度、峰高三重判定条件进行收集；其中通过光谱相似度的定性判断可排除保留时间相同的干扰物质；通过峰纯度值的定量判断可保证收集组分为单一物质；通过峰高的定量判断可确保收集组分的浓度符合要求。本发明无需人为干预，自动化高，收集准确性高，重复性好。提高了系统的智能化、自动化与可操作性，省去了收集过后二次判别处理的过程，使得制备液相色谱馏分收集更加高效准确。

技术领域

本发明涉及高效液相色谱领域，具体为一种制备型液相色谱馏分收集装置及方法。

背景技术

目前，随着分析仪器的发展，液相色谱法作为一种有效实现样品回收或样品纯化制备的方法，被广泛的应用在生命科学、中药、生物化工、医药及科研等领域中。

馏分收集器是半制备/制备型液相色谱仪的辅助装置，主要用于收集色谱分离后的组分。馏分收集器可按色谱峰的信号，以手工或自动控制方式进行收集。自动控制方式具有智能化、收集效率高的特点，正逐步取代传统手动收集方式。但自动收集过程对色谱峰信号的判别直接影组分的准确性，以及后续馏分的进一步鉴定或处理结果。因此，一种好的收集信号判别方式在整个馏分收集过程起到了至关重要的作用。

目前对于色谱信号判别的方式常采用以下方式：

1)手动方式。实验人员通过肉眼观察色谱出峰状态，判断色谱峰的起落点。当满足收集条件时，手动将收集口移至收集瓶进行收集，在收集结束后再移回废液口。该方式由于采用人为干预方式，收集过程存在较大误差，收集效果无法保证。

2)按时间收集。实验初期先对条件进行摸索，找到色谱峰通常出峰时间。在实际实验过程中按得到的经验值设定收集方法，即收集起始和结束时间。由于起始时间和结束时间都为定值，而色谱峰出峰时间会随环境温度、液相色谱系统状态等条件发生变化。因此，按时间收集判别方式无法保证收集样品具有相同的准确性，个体差异大批次间重复性不好。

3)按色谱阈值收集。这是一种按照样品吸光度值大小来判断收集条件的方法。首先根据样品色谱峰的特性，分别设定好起始收集阈值和结束收集阈值。实验过程中当色谱峰的吸收值超过起始阈值后开始启动收集，当吸收值下降至结束阈值后停止收集。此种收集判别方式成立的前提条件是所收集的色谱峰仅含有单一组分。对于含有两种及以上近似组分的色谱峰收集效果较差。在收集结束后还要通过繁琐的步骤鉴定和处理。

发明内容

为克服现有技术中存在的问题，本发明提供一种制备型液相色谱馏分收集装置及方法，检测部分采用二极管阵列检测器光谱信号作为收集判断依据，通过光谱相似度、峰纯度、峰高三重判定收集条件；无需人为干预，自动化高，收集准确性高，重复性好且无需二次鉴定处理。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种制备型液相色谱馏分收集方法，包括以下步骤：

S1：注射待收集组分对照品溶液；

S2：采集待收集组分的紫外可见吸收光谱；

S3：将待收集组分光谱存入光谱图库；

S4：注射待分离样品溶液；

S5：开始采集并归零计时；

S6：实时采集待分离样品色谱图与光谱图；

S7：当保留时间t_n符合起止时间范围，即t₁≤t_n≤t₂时进入收集判定阶段；

S8：判定溶液是否满足判定条件，若满足判定条件则进入下一步骤；

S9：馏分收集器将溶液分入收集瓶中。

本发明进一步设置为：步骤S8中所述的判定条件包括：