[发明专利]一种胃癌类器官培养基及培养方法

权利要求书

1.一种胃癌类器官培养基，其特征在于，由基础培养基和以下终浓度的组分组成：

GlutaMax 1x，Nicotinamide 10mM，A83-01 0.5μM，Hydroxyfasudil 5μM，N-Acetylcysteine 1.25mM，Penicillin/Streptomycin 100IU/mL，Wnt 3A 200ng/mL，R-Spondin-1 250ng/mL，Noggin 150ng/mL，FGF-7 25ng/mL，FGF-10 10ng/mL，Epiregulin800ng/mL，Capsanthin 10ng/mL和B27 0.5x；或

GlutaMax 1x，Nicotinamide 10mM，A83-01 0.5μM，Hydroxyfasudil 10μM，N-Acetylcysteine 1.25mM，Penicillin/Streptomycin 100IU/mL，Wnt 3A 100ng/mL，R-Spondin-1 250ng/mL，Noggin 100ng/mL，FGF-7 50ng/mL，FGF-10 10ng/mL，Epiregulin200ng/mL，Capsanthin 200ng/mL和B27 0.5x；或

GlutaMax 1x，Nicotinamide 10mM，A83-01 0.5μM，Hydroxyfasudil 50μM，N-Acetylcysteine 1.25mM，Penicillin/Streptomycin 100IU/mL，Wnt 3A 150ng/mL，R-Spondin-1 250ng/mL，Noggin 180ng/mL，FGF-7 80ng/mL，FGF-10 12ng/mL，Epiregulin10ng/mL，Capsanthin 500ng/mL和B27 0.5x；或

GlutaMax 1x，Nicotinamide 10mM，A83-01 0.5μM，Hydroxyfasudil 70μM，N-Acetylcysteine 1.25mM，Penicillin/Streptomycin 100IU/mL，Wnt 3A 100ng/mL，R-Spondin-1 250ng/mL，Noggin 100ng/mL，FGF-7 50ng/mL，FGF-10 10ng/mL，Epiregulin400ng/mL，Capsanthin 700ng/mL和B27 0.5x；或

GlutaMax 1x，Nicotinamide 10mM，A83-01 0.5μM，Hydroxyfasudil 80μM，N-Acetylcysteine 1.25mM，Penicillin/Streptomycin 100IU/mL，Wnt 3A 300ng/mL，R-Spondin-1 250ng/mL，Noggin 200ng/mL，FGF-7 100ng/mL，FGF-10 15ng/mL，Epiregulin600ng/mL，Capsanthin 800ng/mL和B27 0.5x；

所述基础培养基为Advanced DMEM/F12，胃癌类器官培养基pH值为7.0-7.2。

2.根据权利要求1所述的胃癌类器官培养基，其特征在于，加入HEPES调节胃癌类器官培养基的pH值。

3.一种胃癌类器官的培养方法，其特征在于，对胃癌组织进行处理获得胃癌细胞，将胃癌细胞与基质胶混合后重悬，然后接种，待其凝固后加入权利要求1-2任一项所述的培养基进行培养，得到胃癌类器官。

4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，对胃癌组织进行处理具体为：将胃癌组织清洗后进行剪切，然后加入消化液进行消化处理30-60min，终止消化，离心，收集细胞；其中消化液为Ⅰ型胶原酶。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，加入消化液后于37℃，5%CO₂条件下消化处理60min。

6.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，加入培养基后于37℃，5%CO₂条件下进行培养，培养过程中，每隔2-3天更换一次培养基，培养4-10天，得到胃癌类器官。