[发明专利]重组表达具有明胶酶活性p37k蛋白酶的方法及其提高p37k蛋白酶性能的方法

权利要求书

1.重组表达具有明胶酶活性p37k蛋白酶的方法，其特征在于：将p37k基因通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达，纯化后在0～10℃下激活处理，获得具有明胶酶活性p37k蛋白酶。

2.根据权利要求1所述重组表达具有明胶酶活性p37k蛋白酶的方法，其特征在于：所述p37k基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.提高p37k蛋白酶性能的方法，其特征在于：所述性能为稳定性或活性；提高稳定性的方法为将重组p37k蛋白酶激活处理后与中肠提取物或金属离子溶液混合，得到热稳定性提高的p37k蛋白酶；提高活性的方法为将重组p37k蛋白酶激活处理后与E64蛋白酶抑制剂共混。

4.根据权利要求3所述提高p37k蛋白酶热稳定性的方法，其特征在于：所述激活处理是在温度为0～10℃下激活处理至少120小时。

5.根据权利要求3所述提高p37k蛋白酶稳定性的方法，其特征在于：所述中肠提取物为取家蚕中肠组织，去除内容物后匀浆得到的匀浆液。

6.根据权利要求3所述提高p37k蛋白酶稳定性的方法，其特征在于：所述金属离子溶液为含K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺中的一种或多种离子的溶液。

7.根据权利要求3所述提高p37k蛋白酶稳定性的方法，其特征在于：所述金属离子溶液为CaCl₂或KCl、MgCl₂、CaCl₂与ZnCl₂的混合物溶液。

8.中肠提取物或金属离子溶液在制备提高p37k蛋白酶热稳定性的保护剂中的应用，其特征在于：所述p37k蛋白酶为p37k基因通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达，纯化后在激活处理得到有具有明胶酶活性的组分。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述中肠提取物为取家蚕中肠组织，去除内容物后匀浆得到的匀浆液。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述金属离子溶液为含K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺中的一种或多种离子的溶液。