[发明专利]一种人原代细胞分离试剂盒及分离方法

权利要求书

1.一种人原代细胞分离试剂盒，其特征在于，包括：组织处理液、细胞消化液和细胞获取液；

所述组织处理液的组分包括平衡盐溶液、青霉素、链霉素和两性霉素；所述细胞消化液由消化酶、血清和基础培养基组成；所述细胞获取液的组分为人组织细胞培养基。

2.根据权利要求1所述的人原代细胞分离试剂盒，其特征在于，所述组织处理液的具体成分浓度为：500-50U/ml的所述青霉素、500-50mg/ml的所述链霉素和1-4ug/ml的所述两性霉素。

3.根据权利要求1所述的人原代细胞分离试剂盒，其特征在于，所述细胞消化液中的消化酶的浓度为0.1-0.25％，血清浓度为10-20％，基础培养基为DMEM/F12。

4.根据权利要求3所述的人原代细胞分离试剂盒，其特征在于，所述消化酶包括胰酶和Ⅰ型胶原酶。

5.根据权利要求1所述的人原代细胞分离试剂盒，其特征在于，所述人组织细胞培养基由基础培养基和血清组成。

6.一种人原代细胞分离方法，其特征在于，包括：

将人组织置于培养皿中，加入组织处理液对所述人组织进行漂洗和浸泡，并在漂洗和浸泡之后弃去所述组织处理液；

将经漂洗和浸泡后的人组织中加入4-10ml细胞消化液，并将所述人组织进行剪裁，得到组织碎片，并将所述细胞消化液和所述组织碎片置于37℃、5％CO₂的孵箱中孵育1-4h；

利用移液管对所述细胞消化液和所述组织碎片进行吹打，并利用目网筛对吹打后的组织液体进行过滤，并进行离心，以去除上清液；

将去除上清液的组织液体中加入人细胞，并获取重悬细胞，对所述重悬细胞进行离心，以去除上清液得到细胞沉淀，将所述细胞沉淀加入至培养基进行重悬，并进行接种培养，以获得分离后的人原代细胞。