[发明专利]一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于，包括：样本稀释液和检测试纸；

所述检测试纸包括底板，所述底板上方设置有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上端设置有吸水纸，所述硝酸纤维素膜下端设置有结合垫，所述结合垫下端设置有样品垫，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线；

所述样本稀释液，以质量分数计，包括以下组分：

0.5～1.2份氯化钠；

0.1～0.5份Tween20；

5～20份血清；

0.02～0.1份PVP-K30；

0.1～0.5份PEG20000；

0.05～0.2份Proclin-300；

77.5～94.23份纯化水；

并调节PH至7.0～7.6。

2.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒及，其特征在于：所述检测线和质控线间隔4～8mm。

3.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于：所述检测线含有新冠病毒重组抗原N蛋白、S蛋白、RBD蛋白中的一种或多种，包被浓度为0.5mg/ml～2mg/ml，包被缓冲液为0.02M Tris-HCl缓冲液，2％蔗糖，PH8.5。

4.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于：所述质控线含有鼠抗人IgG多克隆抗体、羊抗人IgG单克隆抗体、兔抗人IgG单克隆抗体中的一种或多种，包被浓度为0.5mg/ml～2mg/ml，包被缓冲液为0.01M PBS缓冲液，2％海藻糖，PH7.4。

5.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于：吸水纸下端压在硝酸纤维素膜上端1～2mm处，吸水纸材质为玻璃纤维膜、聚酯膜、厚滤纸中的一种。

6.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于：所述结合垫上端压在硝酸纤维素膜下端1～2mm处，结合垫材质为玻璃纤维膜、聚酯膜、无纺布中的一种；所述结合垫固化有胶体金标记的SPA、SPG、鼠抗人IgG单克隆抗体、羊抗人IgG单克隆抗体、兔抗人IgG单克隆抗体中的一种或多种；胶体金标记SPA的浓度为10ug/ml～30ug/ml，胶体金粒径为20～50nm。

7.如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒，其特征在于：所述血清为新生牛血清、胎牛血清、鸡血清、兔血清中的一种；样本稀释液需用0.22um过滤器过滤，可有效过滤去除杂质。

8.一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

分别裁剪适宜尺寸的底板、硝酸纤维素膜、吸水纸、结合垫及样品垫；

将样品垫经过样品垫处理液预处理，结合垫固化胶体金标记的SPA；

硝酸纤维素膜上包被检测线和质控线；

将硝酸纤维素膜与底板贴合，在硝酸纤维素膜上端设置吸水纸，下端设置结合垫，结合垫下端设置样品垫，该新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒制备完成；

其中，吸水纸材质为聚酯膜，样品垫、结合垫材质为玻璃纤维膜。

9.如权利要求8所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒制备方法，其特征在于：所述结合垫固化胶体金标记的SPA，包括以下步骤：

用0.2M K₂CO₃溶液调节胶体金PH在8.0-8.5，按照10ug/ml～30ug/ml标记量加入SPA，搅拌混匀反应30～60min，用20％BSA溶液封闭，封闭液终浓度为0.5％～1％，离心弃上清，沉淀复溶至原体积1/2，得到复溶的金标SPA；

用喷金仪将复溶的金标SPA均匀的喷涂于玻璃纤维膜上，喷金量为4ul/cm—8ul/cm，后放于37℃干燥间烘干处理24-32h；

其中，复溶液为含有0.1～0.5％PEG20000、0.5～1％酪蛋白、1％～5％蔗糖、0.05％-0.2％Tween80的0.02M Tris-HCl缓冲液。

10.如权利要求8所述的一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒制备方法，其特征在于：所述样品垫处理液，以质量分数计，包括以下组分：

0.1～0.3份碳酸钾；

0.05～0.1份氯化钠；

20～40份血清；

0.01～0.05份SDS；

0.1～0.5份Tween80；

0.02～0.1份PEG20000；

0.05～0.2份Proclin950；

58.75～79.67份纯化水；

调节PH至8.0～8.2；

其中，血清为新生牛血清、胎牛血清、鸡血清、兔血清中的一种，优选鸡血清；样品垫处理液需用0.22um过滤器过滤，可有效过滤去除杂质。