[发明专利]一种采用膜分离纯化虫草多糖的方法

权利要求书

1.一种采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将粗虫草多糖液减压浓缩，静置后分离得到浓缩沉淀a和浓缩液a；将浓缩液a再次减压浓缩，静置后分离得到浓缩沉淀b和浓缩液b；将浓缩沉淀a与浓缩沉淀b混合得到浓缩沉淀c；

(2)将浓缩沉淀c加入氢氧化钠溶液中搅拌均匀，过滤，除去沉淀，将产物与浓缩液a、浓缩液b合并；然后向其中加入蛋白酶K溶液，50-60℃酶解1-2h，加入乙醇溶液中沉淀，离心除去上清液，干燥得到粗提虫草多糖；

(3)向粗提虫草多糖中加水至浓度为0.05mg/mL，采用50-100kDa超滤膜超滤，超滤过程中密封隔氧得到一次透过液和一次截留液，将一次截留液真空冷冻干燥得到一次分离虫草多糖；

(4)将一次透过液采用5-10kDa超滤膜超滤得到二次透过液和二次截留液，将二次截留液真空冷冻干燥得到二次分离虫草多糖；

(5)将二次透过液采用1kDa超滤膜超滤得到三次透过液和三次截留液；将三次截留液真空冷冻干燥，得到三次分离虫草多糖；将三次透过液真空冷冻干燥得到四次分离虫草多糖。

2.根据权利要求1所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(1)中，将粗虫草多糖液减压浓缩至其体积的20-30％。

3.根据权利要求1所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(1)中，将浓缩液a再次减压浓缩至其体积的40-60％。

4.根据权利要求1所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(2)中，氢氧化钠溶液的浓度为0.8-1.2mol/L。

5.根据权利要求1所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(2)中，蛋白酶K溶液的浓度为1-5g/L。

6.根据权利要求1所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(3)-(5)中，超滤压强为0.5-2MPa，超滤转速为500-1000r/min。

7.根据权利要求6所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(3)的超滤过程中，调节超滤压强为0.5-0.7MPa，保压20-30min，调节超滤压强为1.1-1.5MPa，保压10-20min，调节超滤压强为1.7-2MPa，保压5-7min。

8.根据权利要求6所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(4)的超滤过程中，调节超滤压强为0.5-0.7MPa，保压10-15min，调节超滤压强为1.2-1.6MPa，保压20-30min，调节超滤压强为1.8-2MPa，保压5-7min。

9.根据权利要求6所述采用膜分离纯化虫草多糖的方法，其特征在于，步骤(5)的超滤过程中，调节超滤压强为0.5-0.7MPa，保压7-10min，调节超滤压强为1-1.3MPa，保压10-15min，调节超滤压强为1.6-2MPa，保压10-15min。