[发明专利]含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法及其应用

说明书

本发明涉及中药药物分析方法技术领域，尤其是涉及一种含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法及其应用。所述鉴别方法，包括如下步骤：采用UPLC‑QqQ/MS对制剂的供试品溶液进行检测，获得MRM色谱图；液相色谱条件：色谱柱为Hss T3C18色谱柱；柱温为30±5℃；以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱；质谱条件：ESI+模式，采用多反应监测采集方式。本发明采用上述方法可对含水蛭、全蝎、僵蚕、土鳖虫4味动物药中的任一种或多种的制剂进行定性鉴别，该方法专属性强、灵敏度高，可以有效提高制剂的质量控制。

技术领域

本发明涉及中药药物分析方法技术领域，尤其是涉及一种含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法及其应用。

背景技术

中药材按其来源属性分为植物药、动物药、矿物药3类，其中动物类药材是动物的组织、器官、腺体、体液、分泌物以及皮、骨、角、甲和胎盘等的加工品。2015年版《中国药典》一部共收载55种动物药材、1种动物药材提取物和458种含有动物药材的制剂，占全部品种的18％。动物药药理作用显著，但由于其化学活性成分类型多样、成分复杂、分析方法欠缺等原因，现有动物药质量及质控标准存在较大问题，主要表现：①质控标准缺失或不完善；②动物药由于脂肪及蛋白含量高，易吸收空气中的水分而潮解，从而产生霉变；同时容易产生虫蛀及色泽变化、有效成分降解等问题。如何对动物药进行有效监测，对保证动物药药用安全具有重要意义。

2020版《中国药典》一般采用性状、显微鉴别、薄层色谱等方法对动物药进行鉴别。然而，上述传统方法缺乏特异性，且需要经验丰富的实验员。此外，由于加工的原因，动物药失去了组成物种的微观和形态特征，因此，很难发现含动物药的制剂中是否包含动物药。动物药的成分主要是复杂的大分子，如蛋白质和多肽。近年来动物药的质量控制研究主要集中在内源性小分子的质量标记(Q-Marker)的定量，如总多糖、核苷、氨基酸等。然而，由于动物药中内源性小分子丰富，无法找出物种特异性标记物。因此，对这一类天然药物进行大分子监测并揭示其内在差异是一项具有挑战性的任务，因此有必要制定一种新的策略来对含动物药的制剂如芪蛭通络胶囊中的动物药进行质量控制。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的一个目的在于提供含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法，以解决现有技术中存在的含动物药的制剂质量控制困难等技术问题。

本发明的又一目的在于提供含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法在芪蛭通络胶囊的质量控制中的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

含水蛭、全蝎、僵蚕和/或土鳖虫的制剂的鉴别方法，包括如下步骤：

采用液质联用法UPLC-QqQ/MS对制剂的供试品溶液进行检测，获得MRM色谱图；

所述液质联用法UPLC-QqQ/MS的条件包括：

液相色谱条件：色谱柱为Hss T3 C18色谱柱；柱温为30±5℃；以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱；

质谱条件：ESI+模式，离子源温度为100～150℃，毛细管电压为2.5～3.5kV，锥孔电压为15～30V，除溶剂温度为400～500℃，除溶剂气体流速为800～1000L/h，采用多反应监测采集方式。

本发明采用上述方法对含水蛭、全蝎、僵蚕、土鳖虫4味动物药中的任一种或多种的制剂进行定性鉴别，该方法专属性强、灵敏度高，可以有效提高含上述几味动物药的制剂的质量控制。