[发明专利]一种检测Hg2+

说明书

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种检测Hgsupgt;2+/supgt;的生物传感器及检测方法和应用。检测Hgsupgt;2+/supgt;的生物传感器，包括以下组分：发卡探针，所述发卡探针含有切刻内切酶Nb.BbvCI的半识别位点序列和G‑四链体序列；引物探针，所述引物探针与所述发卡探针的一部分互补。本发明中的检测Hgsupgt;2+/supgt;的生物传感器能够基于引物‑模板转换的级联信号放大策略用于西洋参水浸出液中Hgsupgt;2+/supgt;的超灵敏检测，所述生物传感器将滚环扩增(RCA)、多重链置换扩增(MRSDA)和基于G‑四链体的turn‑on荧光开关相结合，检测灵敏度高，能有效控制背景信号，具有良好的抗干扰能力，可以用于西洋参水浸出液样品的直接检测，表现出良好的选择性，在复杂基质样品检测中具有应用前景。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种检测Hg²⁺的生物传感器及检测方法和应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

中药西洋参是五加科植物panacis quinquefolii radix的干燥根茎，在中医药理论体系中具有补气养阴、清热生津的功效，作为常用药材广泛应用于临床治疗和日常保健。西洋参在培育过程中会因环境污染而吸收和积累一定程度的有毒物质。考虑到在病人和虚弱者等特殊人群中有较高的使用频率和使用量，西洋参中毒性物质的监测已经成为用药安全不可忽视的部分。其中重金属污染，特别是汞(Hg)污染，因其毒性剧烈和生物富集明显而受到越来越到的关注。每年有近万吨Hg被排放进入环境中，这些Hg难以被生物降解而不断通过食物链富集，在进入人体后几乎不能被排泄且表现出强烈的毒性，对神经系统、免疫系统和消化系统造成永久性损伤。因此，西洋参中Hg的检测对监管食品、药品安全和维护生命健康有重要意义。

为满足上述检测需求，一些仪器分析方法被开发，包括原子吸收光谱法(AAS)、原子荧光光谱法(AFS)和电感耦合等离子体发射质谱法(ICP-MS)。然而，这些方法依赖昂贵、精密的仪器，而且通常不能直接检测复杂基质样品，这一定程度上限制了在现场检测中的应用。近年来，基于T-Hg-T的分析方法因灵敏、操作简单和抗干扰能力强的特点而受到越来越多的关注。特别是一些T-Hg-T分析-核酸扩增联用方法通过循环的核酸复制、组装或水解，将Hg信号被转化为显著放大的核酸信号，进一步提升了检测的灵敏度。这些方法通常通过基于DNA模板的聚合或切刻反应获得放大的信号。然而，这些方法中外加的DNA模板通常与目标物不相关，这种非目标物依赖性的模板与其他探针或酶的非特异性相互作用会导致假阳性或假阴性信号，导致检测准确性降低。因此，仍有必要开发新的检测方法，以满足灵敏、准确检测Hg的需求。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种检测Hg²⁺的生物传感器及检测方法和应用，本发明中的检测Hg²⁺的生物传感器能够基于引物-模板转换的级联信号放大策略用于西洋参水浸出液中Hg²⁺的超灵敏检测，所述生物传感器将滚环扩增(RCA)、多重链置换扩增(MRSDA)和基于G-四链体的turn-on荧光开关相结合，检测灵敏度高，能有效控制背景信号，具有良好的抗干扰能力，可以用于西洋参水浸出液样品的直接检测，表现出良好的选择性，在复杂基质样品检测中具有应用前景。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下所述：

在本发明的第一方面，提供一种检测Hg²⁺的生物传感器，包括以下组分：

发卡探针，所述发卡探针含有切刻内切酶Nb.BbvCI的半识别位点序列和G-四链体序列；

引物探针，所述引物探针与所述发卡探针的一部分互补。