[发明专利]一种作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒，其特征在于，包括第一功能试剂和第二功能试剂；

所述第一功能试剂包含长链化合物改性凝血酶；所述长链化合物改性凝血酶的肝素和/或ATIII的结合位点完全或部分封闭；所述长链化合物改性凝血酶表现出对肝素和/或ATIII浓度或活性变化的不敏感性；

所述长链化合物为分子量大于1000的聚乙二醇；

待改性的凝血酶与长链化合物的结合位点为氨基，所述长链化合物改性凝血酶的蛋白条带灰度分布峰值对应的分子量需大于40KDa；

所述第二功能试剂包含至少一种凝血酶底物；所述凝血酶底物可以与作用于凝血酶的抗凝药物竞争结合所述长链化合物改性凝血酶；所述凝血酶底物包括发色底物；

所述抗凝药物为达比加群，所述发色底物选自S-2366。

2.如权利要求1所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒，其特征在于，所述长链化合物改性凝血酶通过长链化合物共价结合于凝血酶制备得到。

3.如权利要求1所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒，其特征在于，所述第一功能试剂还至少包括含有活性组分的缓冲溶液；和/或所述活性组分包括盐类保护剂、蛋白类保护剂、糖类保护剂、氨基酸类保护剂、醇类保护剂、表面活性剂以及防腐剂中的至少一种。

4.如权利要求1所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒，其特征在于，所述作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒还包括稀释液、校准品。

5.权利要求4所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒，所述长链化合物改性凝血酶的用量可以与校准品中的达比加群最大浓度、第一功能试剂及校准品加入体积建立如下公式：

k*V1*C1=V2*C2，

其中V1为绘制校准曲线时校准品加入体积，C1为校准品中达比加群的最大浓度，V2为所述第一功能试剂加入体积，C2为所述第一功能试剂中所述长链化合物改性凝血酶的浓度，k为固定系数，需大于0.04 U·mL^-1/ng·mL^-1。

6.如权利要求1-5任一项所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：分别配置第一功能试剂和第二功能试剂，分别密封包装。

7.如权利要求1-5任一项所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒的非诊断或治疗目的的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

通过样本和稀释液混合配制待测样品溶液，随后在所述待测样品溶液中加入第一功能试剂和第二功能试剂继续进行混合得到最终反应溶液并进行反应；

通过检测反应后生成物质的情况，判断作用于凝血酶的抗凝药物的含量；

所述抗凝药物为达比加群。

8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述样本与最终反应溶液的体积比例需小于1:6。

9.如权利要求1-5任一项所述的作用于凝血酶的抗凝药物检测试剂盒用于制备检测作用于凝血酶的抗凝药物的试剂中的应用，所述抗凝药物为达比加群。