[发明专利]一种高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料及其制备方法

说明书

本发明提供了一种高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料及其制备方法，属于生物技术制药技术领域。本发明通过生物酶技术将表皮生长因子和胶原蛋白反应产生分子内交联，起到保护表皮生长因子三维分子结构，使其活性中心构象在水溶液中稳定不易被降解，交联的表皮生长因子活性产品可常温保存，存放一年生长因子活性仍保持90％以上，储存条件宽松，产品有效期延长。

技术领域

本发明涉及生物技术制药技术领域，尤其涉及一种高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料及其制备方法。

背景技术

人表皮生长因子(hEGF)广泛存在于体液和多种腺体中，hEGF在体内的含量极微。随着基因工程技术的发展，生物学家通过基因重组技术，成功利用大肠杆菌为宿主生产hEGF，实现了工业化生产rhEGF。EGF可刺激多种动物细胞的增殖，常应用于促进人体表皮细胞、内皮细胞生长和修护，对于角膜损伤、烧烫伤及医美手术后等创面的修复和愈合有很好的疗效。

人表皮生长因子(hEGF)分子结构由53个氨基酸组成，分子量6201道尔顿，分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键，形成3个分子内环型结构，组成生物活性所必须的受体结合区域，表皮生长因子是一种生物活性蛋白质，分子结构不稳定，在有水的环境中EGF分子结构易被破坏照成活力损失，通常表皮生长因子在水溶液中活性一般只能存活7-10天。

目前国内以表皮生长因子(EGF)为原料生产的表皮细胞修复制剂有凝胶、水剂、敷料、冻干粉等品种，为了保护表皮生长因子的活性，在生产产品一般需要添加适当保护剂和抗氧化剂以减缓EGF的失活，但也仅限于延缓EGF的活力下降，不能根本解决EGF的失活，如何维持产品中EGF分子结构稳定，是确保产品EGF活性及使用效果的关键。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料，该敷料具有保护表皮生长因子三维分子结构，使其活性中心构象在水溶液中稳定不易被降解，交联的表皮生长因子活性产品可常温保存，存放一年生长因子活性仍保持90％以上，储存条件宽松，产品有效期延长。

本发明的高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料，由敷料基础液和表皮生长因子-水解胶原蛋白交联物(hEGF-HC)组成；

所述表皮生长因子-水解胶原蛋白交联物，包括以下重量百分数的原料：

重组人表皮生长因子 1.0-5.0％，

水解胶原蛋白 3.0-15.0％，

谷氨酰胺转氨酶 0.1％，

余量为纯化水。

优选的，所述表皮生长因子-水解胶原蛋白交联物占所述敷料的质量比例为0.2％。

优选的，所述重组人表皮生长因子的活性为7500万U/g。

优选的，所述水解胶原蛋白为猪水解胶原蛋白或牛水解胶原蛋白，分子量范围200KD-500KD。

优选的，所述谷氨酰胺转氨酶的活性为120U/g。

优选的，所述敷料基础液，包括以下重量百分数原料：

本申请另一个目的是提供一种高稳定性重组人表皮生长因子创面修护敷料的制备方法，包括以下步骤：

步骤S1、制备表皮生长因子-水解胶原蛋白交联物：

步骤S1-1、按比例称取表皮生长因子、水解胶原蛋白，用预冷20℃纯化水搅拌溶解；

步骤S1-2、加入谷氨酰胺转氨酶，在20℃恒温水浴条件下以60rpm的转速搅拌反应8-10小时，用0.22um微孔滤膜过滤，收集滤液，得到表皮生长因子-水解胶原蛋白交联物(hEGF-HC)；放入冰箱冷藏备用；