[发明专利]细胞牵引力的测量方法

权利要求书

1.一种细胞牵引力的测量方法，其特征在于，所述方法包括：(A)在基底材料表面形成示踪用荧光球体的步骤；(B)细胞外基质蛋白修饰的步骤；(C)图像采集的步骤以及(D)位移场和牵引力场计算的步骤，其中，

步骤(A)中，所述基底材料为经由具有伯胺基的不饱和单体共聚改性的聚丙烯酰胺材料；所述荧光球体的平均粒径为90～110nm；

步骤(B)中，所述细胞外基质蛋白经由光反应蛋白交联剂与所述荧光球体结合，所述结合引起所述基底材料表面形变；

步骤(C)中，包括使用基于结构光照明显微镜(structured illuminationmicroscopy,SIM显微镜)采集所述荧光球体在所述细胞外基质蛋白作用下的形变图像；

步骤(D)中，通过计算机软件程序辅助进行位移场的计算以及细胞牵引力场的计算。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述聚丙烯酰胺材料为至少部分交联的聚丙烯酰胺。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述具有伯胺基的不饱和单体为具有伯胺基的丙烯酸酯类单体。

4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，所述基底材料的杨氏模量为0.2～100kPa。

5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述荧光球体的平均粒径为95～105nm。

6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述基底材料表面荧光球体密度为12～16个/每平方微米。

7.根据权利要求1～6任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(B)中，所述光反应蛋白交联剂包括氨基-氨基型交联剂与氨基-羧基型交联剂，优选地，所述光反应蛋白交联剂包括磺基琥珀酰亚胺6-(4'-叠氮基-2'-硝基苯氨基)己酸酯(Sulfo-SANPAH)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)。

8.根据权利要求1～7任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(C)中，使用所述SIM显微镜得到所述所述荧光球体在所述基底材料表面形变前后的位置图像，优选地，所述SIM显微镜包括发射波长为488nm附近激光的发射器，所述SIM显微镜使用100倍物镜球体。

9.根据权利要求1～8任一项所述的方法，其特征在于，所述荧光球体的的发射波长在490～510nm。

10.根据权利要求1～9任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(D)中，包括在正则化参数为λ＝2.0×10^-8～4.0×10^-8的条件下通过Reg-FTTC(Regularized Fourier-transform traction cytometry,Reg-FTTC)方法进行牵引力场的计算。