[发明专利]双特异性抗体及其应用

说明书

本发明提出了一种双特异性抗体及其应用，该抗体包括：包括：第一抗原结合区，所述第一抗原结合区具有CD3分子结合活性；和第二抗原结合区，所述第二抗原结合区具有CD33分子结合活性。本发明所制备的双特异性抗体能同时靶向CD3和CD33，从而介导T细胞对肿瘤细胞的杀伤，具有较强的肿瘤抑制能力。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地，涉及双特异性抗体及其应用，更具体地，涉及重组抗体、核酸分子、表达载体、重组细胞、组合物、所述重组抗体或抗原结合片段或核酸分子或表达载体或重组细胞或组合物在制备药物中的用途、药物、所述重组抗体在制备试剂盒中的用途和试剂盒。

背景技术

癌症是一种严重威胁人民群众的生命健康的疾病，近年来全球癌症的发生率、死亡率不断上升。目前已有的癌症治疗手段，包括手术切除、放疗、化疗、小分子靶向治疗、抗体靶向治疗、大分子免疫治疗等治疗方法，但上述方法仅在部分癌症患者中发挥有限的作用，癌症仍是困扰人类生命健康的难题。

急性髓系细胞白血病是髓系前体细胞不受控增殖造成的癌症。急髓发病率与年龄正相关，其中60-70岁人群发病率最高。急髓的标准疗法为化疗后进行骨髓移植，但是由于高龄患者无法耐受化疗带来的副作用，因此60岁以上患者的五年生产率只有10％。由于急髓患者肿瘤细胞的基因突变具有异质性，小分子靶向药只能适用于含有相应基因突变的少数患者，严重限制了该类药物的适用性。

CD33是种I型跨膜蛋白，其表达在髓系细胞、急髓患者的髓系前体细胞(肿瘤细胞)表面，但不表达在正常干细胞表面，因而靶向CD33的疗法是一种潜在的急髓患者通用的疗法。例如，Mylotarg是一款抗体偶联药物，由靶向CD33的单克隆抗体和与之连接的细胞毒素卡其霉素组成，本质上是利用抗体靶向肿瘤细胞递送化疗药物。临床上发现该药物会引发严重不良反应包括肝毒性(包括静脉闭塞性疾病)、输注相关反应(包括过敏反应)和出血等。

因此，仍需进一步开发低免疫原性、低毒性以及强亲和力的双特异性抗体。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

CD33是种I型跨膜蛋白，其表达在髓系细胞、急髓患者的髓系前体细胞(肿瘤细胞)表面，但不表达在正常干细胞表面，因而靶向CD33的疗法是一种潜在用于髓系细胞白血病的的疗法。

CD3抗体单链可变片段(ScFv)能够结合T细胞，发明人设计了靶向CD3和CD33的双特异抗体，经过大量实验筛选后，获得了优势双特异性抗体CD3×CD33，该双特异抗体能够同时与CD33阳性肿瘤细胞以及T细胞进行结合，有效介导T细胞对肿瘤细胞的杀伤，具有较强的抗癌能力。

因此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种重组抗体。根据本发明的实施例，包括：第一抗原结合区，所述第一抗原结合区具有CD3分子结合活性；和第二抗原结合区，所述第二抗原结合区具有CD33分子结合活性。根据本发明实施例的重组抗体可以同时与CD3和CD33进行结合，有效介导T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，具有较强的肿瘤抑制能力。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种核酸分子。根据本发明的实施例，所述核酸分子编码第一方面所述的重组抗体。根据本发明实施例的核酸编码的重组抗体可以同时与CD3和CD33进行结合，有效介导T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，具有较强的肿瘤抑制能力。

在本发明的第三方面，本发明提出了一种表达载体。根据本发明的实施例，携带第二方面所述的核酸分子。所述表达载体可包括可选的控制序列，所述控制序列与所述核酸分子进行可操作地连接。其中，所述控制序列为可指导所述核酸分子在宿主中表达的一个或多个控制序列。本发明实施例所提出的表达载体可在适合的宿主细胞中高效表达所述重组抗体，所述重组抗体可以同时与CD3和CD33进行结合，有效介导T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，具有较强的肿瘤抑制能力。