[发明专利]检测高血压精准用药相关基因的试剂盒

权利要求书

1.一种检测高血压精准用药相关基因的试剂盒，其特征在于：包括反应液Ⅰ、反应液Ⅱ、反应液Ⅲ、反应液Ⅳ和反应液Ⅴ；

所述反应液Ⅰ为PCR反应所必须的试剂；

所述反应液Ⅱ包括检测CYP2D6基因、ADRB1基因、NPPA基因和CYP3A5基因的野生型正向引物、野生突变型共用反向引物和共用荧光探针；

所述反应液Ⅲ包括检测CYP2D6基因、ADRB1基因、NPPA基因和CYP3A5基因的突变型正向引物、野生突变型共用反向引物和荧光探针；

所述反应液Ⅳ包括检测ACE基因、CYP2C9基因和AGTR1基因的野生型正向引物、野生突变型共用反向引物和共用荧光探针；

所述反应液Ⅴ包括检测ACE基因、CYP2C9基因和AGTR1基因的突变型正向引物、野生突变型共用反向引物和共用荧光探针。

2.根据权利要求1所述的检测高血压精准用药相关基因的试剂盒，其特征在于：所述反应液Ⅰ包括：AceTaq DNA聚合酶、Heat-labile UDG、Specific ROX Reference、dNTP/dUTPmix和Mg²⁺。

3.根据权利要求1所述的检测高血压精准用药相关基因的试剂盒，其特征在于：所述反应液Ⅱ中的引物、探针的核苷酸序列如下所示，4条探针上连接不同的荧光标记：

(1)CYP2D6-WF：GCTGGGCTGCACGCTAAC；

(2)CYP2D6-R：CCTCCCTCACCTGGTCGAA；

(3)CYP2D6-P：ACCAGGCCCCCTGCCACTGC，5’端标记FAM，3’端标记BHQ1；

(4)ADRB1-WF：CGCAAGGCCTTGCAGG；

(5)ADRB1-R：TGGGTCGCGTGGCG；

(6)ADRB1-P：ACTGCTCTGCTGCGCGCGC，5’端标记VIC，3’端标记BHQ1；

(7)NPPA-WF：AGATATGTCTGTGTTCTCTTTGCAGTGCT；

(8)NPPA-R：GGCAACAAGATGACACAAATGC；

(9)NPPA-P：CAGACTGCAAGAGGCTCCTGTCCCC，5’端标记NED，3’端标记BHQ2；

(10)CYP3A5-WF：GTGGTCCAAACAGGGAAGAGATGT；

(11)CYP3A5-R：CATTATGGAGAGTGGCATAGGAGAT；

(12)CYP3A5-P：CATTCGTTAAGCTGGGTGGTACATACGTGG，5’端标记CY5，3’端标记BHQ3。

4.根据权利要求1所述的检测高血压精准用药相关基因的试剂盒，其特征在于：所述反应液Ⅲ中的引物、探针的核苷酸序列如下所示，4条探针上连接不同的荧光标记：

(1)CYP2D6-MF：GCTGGGCTGCACGCTAGT；

(2)CYP2D6-R：CCTCCCTCACCTGGTCGAA；

(3)CYP2D6-P：ACCAGGCCCCCTGCCACTGC，5’端标记FAM，3’端标记BHQ1；

(4)ADRB1-MF：CGCAAGGCCTTGCAGC；

(5)ADRB1-R：TGGGTCGCGTGGCG；

(6)ADRB1-P：ACTGCTCTGCTGCGCGCGC，5’端标记VIC，3’端标记BHQ1；

(7)NPPA-MF：GATATGTCTGTGTTCTCTTTGCAGTGCC；

(8)NPPA-R：GGCAACAAGATGACACAAATGC；

(9)NPPA-P：CAGACTGCAAGAGGCTCCTGTCCCC，5’端标记NED，3’端标记BHQ2；

(10)CYP3A5-MF：GTGGTCCAAACAGGGAAGAGATGC；

(11)CYP3A5-R：CATTATGGAGAGTGGCATAGGAGAT；

(12)CYP3A5-P：CATTCGTTAAGCTGGGTGGTACATACGTGG，5’端标记CY5，3端’标记BHQ3。