[发明专利]鉴定小菜蛾谷氨酸门控氯离子通道基因突变的方法及引物在审

专利信息
申请号: 202210822678.2 申请日: 2022-07-12
公开(公告)号: CN116003560A 公开(公告)日: 2023-04-25
发明(设计)人: 朱斌;孙僖;刘莹;梁沛;高希武 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N15/12;C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 商秀玲
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 鉴定 小菜 谷氨酸 门控 氯离子 通道 基因突变 方法 引物
【权利要求书】:

1.与阿维菌素类杀虫剂抗性相关的蛋白突变体,其特征在于,所述蛋白突变体在谷氨酸门控氯离子通道蛋白的基础上,第263位的缬氨酸突变为异亮氨酸。

2.编码权利要求1所述的蛋白突变体的核酸。

3.根据权利要求2所述的核酸,其核苷酸序列为如下任一种DNA分子:

1).如SEQ ID NO.5所示序列;

2).与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能的蛋白的DNA分子;

3)与1)或2)中的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有相同功能的蛋白的DNA分子。

4.用于检测如权利要求1所述蛋白突变体的引物。

5.根据权利要求4所述的引物,其序列如SEQ ID NO.1~2所示。

6.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求4或5所述的引物。

7.一种鉴定谷氨酸门控氯离子通道基因V263I突变型的方法,其特征在于,使用权利要求5的引物,扩增待测昆虫的谷氨酸门控氯离子通道基因,对如SEQ ID NO.4所示序列中第787位核苷酸进行判定。

8.一种鉴定昆虫对阿维菌素类杀虫剂的抗性的方法,其特征在于,扩增待测昆虫的谷氨酸门控氯离子通道基因,对如SEQ ID NO.4所示序列中第787位核苷酸进行鉴定;

若为GG基因型,待测昆虫对阿维菌素类杀虫剂敏感;若为GA基因型,待测昆虫对阿维菌素类杀虫剂抗性;若为AA基因型,待测昆虫对阿维菌素类杀虫剂抗性。

9.权利要求1所述蛋白突变体、权利要求2或3所述核酸、权利要求4或5所述引物、权利要求6所述试剂盒、权利要求7或8所述的方法在以下任一项中的应用:

1).鉴定谷氨酸门控氯离子通道基因是否发生突变;

2).鉴定昆虫的谷氨酸门控氯离子通道蛋白的表型;

3).鉴定或辅助鉴定昆虫对阿维菌素类杀虫剂的抗性。

10.根据权利要求9所述应用,其特征在于,所述阿维菌素类杀虫剂包括阿维菌素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐中的一种或多种。

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