[发明专利]SortaseA酶作为蛋白水解酶在蛋白纯化领域中的应用有效
| 申请号： | 202210808934.2 | 申请日： | 2022-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN116042585B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 王峰;陈倩;桂文君;王俊超;黄亚亮 | 申请（专利权）人： | 无锡佰翱得生物科学股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;C12N15/57;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/06;C07K1/107;C12R1/19 |
| 代理公司： | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人： | 杜瑶 |
| 地址： | 214000 江苏省无锡市江阴市城*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | sortasea 作为 蛋白 水解 纯化 领域 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.SortaseA酶作为蛋白水解酶在蛋白纯化领域中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，SortaseA酶作为蛋白水解酶的反应条件为：50mMTris-HCl，pH7.5，500mMNaCl,5％glycerol,5mMDTT,0.1MTrehalose，1mMEDTA,5mMGlycine,1mMCaCl2。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SortaseA酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，编码所述SortaseA酶的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，表达所述SortaseA酶的载体为pET-28a,表达菌株为大肠杆菌BL21。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SortaseA酶识别的目的蛋白序列中包含特定的SortaseA识别序列：LPETGGH。
7.一种在目的蛋白上实现修饰标记的方法，其特征在于，利用权利要求1-6中任一所述的SortaseA酶水解目的蛋白，获得酶切后的产物，对酶切后的产物进行分子标记修饰。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述分子标记修饰为生物素修饰、荧光修饰或化学基团修饰。
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