[发明专利]一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法

说明书

本发明公开了一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法，其特征在于，通过微生物发酵产生能水解α‑L‑鼠李糖基、β‑D‑葡萄糖基的酶，该酶与纤维素酶和果胶酶组合成阶梯式酶作用于火棘果中的芦丁，使其转化为皮素，再进行槲皮素的提取；本发明提供的一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法，开辟了一新的槲皮素提取路径，采用阶梯式酶作为提取媒介，将火棘果中的芦丁转化为我们所需要的槲皮素进行提取，相较于传统的槲皮素提取，所需材料容易获取、提取成本低；且整个提取过程操作简单，易于掌握，其有效成分浪费少，槲皮素产率提高，是传统方法提取率的两倍以上，还能避免环境污染。

技术领域

本发明属于药物提取技术领域，具体涉及一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法。

背景技术

火棘果具有较高的营养价值，尤其是含有较多的氨基酸种类，主要包含有人体所必需的8种氨基酸。同时也含有较多的维生素和矿物质，为人体提供了较多的必要营养物质。其营养成分比普通水果如：苹果、梨、桃子等更加丰富及均衡。在古代，火棘果又称救军粮、主要是由于火棘的根、茎、叶、果实和果皮都有“生津止渴、清热解毒”的药用功效。火棘果成分主要分为天然色素、多酚和多糖等。其中，多酚主要含有原花青素、黄酮类(芦丁、槲皮素等)，具有抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、延缓衰老和保肝护胃等多种生物活性。

关于槲皮素在食品和化妆品中的应用较多，因为槲皮素具有较好的祛痰、止咳、降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量和抗氧化性等功效。故对槲皮素的提取成为了一个研究的热点。通常槲皮素的提取主要是从槐米、沙棘、芦荟、枸杞、荞麦、银杏、益母草、夏枯草、桉树叶、烟叶等原料中进行提取。

目前，槲皮素的提取方法主要有浸提法、乙醇回流法、萃取法、超声回流、临界萃取等。这些提取方法大多存在：提取工艺较复杂，不适用于工业化提取槲皮素，且提取率低，能够提取到的槲皮素含量有限。火棘果在云南产量较大、材料易于获取，若能充分利用火棘果资源，从火棘果中进行槲皮素的提取，不仅能大大提高槲皮素的提取收率和含量，还能为槲皮素的来源提供新途径。

因此，深入研究如何从火棘果中提取槲皮素并提升槲皮素提取率的方法是有着重要的现实意义。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明设计了一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法，选择火棘果作为原料，运用阶梯式酶对其内的槲皮素进行提取；槲皮素都属于黄酮类，从结构来说槲皮素是芦丁的苷元，即在槲皮素的第3个碳上连接一个α-L-鼠李糖基、β-D-葡萄糖基就是芦丁；故将芦丁转化为槲皮素需添加合适的酶将其两个基团进行酶解。即通过微生物发酵产生能水解这两个基团的酶与纤维素酶和果胶酶组合形成阶梯式酶，对火棘果中的芦丁进行转化分解，最后形成槲皮素，再通过合理的工艺对槲皮素进行提取分离。

为了达到解决上述技术问题的目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：一种运用阶梯式酶提取火棘果中槲皮素的方法，其特征在于，通过微生物发酵产生能水解α-L-鼠李糖基、β-D-葡萄糖基的酶，该酶与纤维素酶和果胶酶组合成阶梯式酶作用于火棘果中的芦丁，使其转化为为槲皮素，再进行槲皮素的提取；

具体包括以下步骤：

S1、鲜火棘果原料预处理粉碎脱色并干燥；

S2、微生物发酵制取所需酶1和酶2；

S3、取酶1、酶2以及纤维素酶和果胶酶组成阶梯式酶(复合酶)；

S4、将脱色干燥后的火棘果滤渣加入锥形瓶中，加入乙醇溶液、阶梯式酶、蒸馏水，超声提取，随后进行抽滤得到滤液；

S5、在滤液中加入碱液进行除酶，随后过滤，减压干燥沉淀，获得槲皮素；

进一步的，所述S1中将鲜火棘果进行干燥，粉碎并过60目筛；