[发明专利]检测试剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.检测试剂，其特征在于，包括：生物素化-艾蒿过敏原提取物；

所述生物素化-艾蒿过敏原提取物包括：艾蒿过敏原提取物和生物素；

所述艾蒿过敏原提取物包括：艾蒿提取物和艾蒿植物防御素样蛋白。

2.如权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，还包括：链霉亲和素包被的磁微粒、抗人IgE酶标抗体、校准品、生物素化-抗人IgE抗体和缓冲液。

3.如权利要求1所述的检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：取所述艾蒿提取物和所述艾蒿植物防御素样蛋白混合后，获得所述艾蒿过敏原提取物；

S2：取所述生物素与所述艾蒿过敏原提取物混合、透析后，获得所述生物素化-艾蒿过敏原提取物。

4.如权利要求2所述的检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

所述缓冲液包括缓冲液I～缓冲液IV中的一种或多种；

S1：取所述艾蒿提取物和所述艾蒿植物防御素样蛋白混合后，获得所述艾蒿过敏原提取物；

S2：取所述生物素与所述艾蒿过敏原提取物混合，透析后，与所述缓冲液I混合，获得所述生物素化-艾蒿过敏原提取物；

S3：取所述链霉亲和素包被的磁微粒与所述缓冲液II混合、磁分离、弃上清后，获得沉淀；

S4：取所述沉淀与所述缓冲液II混合，获得所述链霉亲和素包被的磁微粒的溶液；

S5：取所述抗人IgE酶标抗体与所述缓冲液III混合，获得所述抗人IgE酶标抗体的溶液；

S6：取IgE抗体与所述缓冲液IV混合，获得所述校准品；

S7：取生物素标记的鼠抗人IgE抗体与所述缓冲液III混合，获得所述生物素化-抗人IgE抗体。

5.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，S1中所述艾蒿提取物与所述艾蒿植物防御素样蛋白的质量比为(1～5):1。

6.如权利要求3至5任一项所述的制备方法，其特征在于，S2中所述生物素与所述艾蒿过敏原提取物的摩尔比为1:(110～250)。

7.如权利要求3至6任一项所述的制备方法，其特征在于，S2中所述生物素化-艾蒿过敏原提取物的终浓度为0.5～1.5μg/mL。

8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲液I包括：5～20％小牛血清、0.5～1％Proclin 300、0.01～0.05％Tween-20、5～10％海藻糖和0.1M磷酸盐缓冲液pH7～9；

所述缓冲液II包括：1～5％BSA、5～10％蔗糖和0.01M Tris-NaCl缓冲液；

所述缓冲液III包括：2～5％Casein、0.5～1％Proclin 300、0.01～0.05％T ween-20、5～10％海藻糖和0.1M磷酸盐缓冲液pH7～9；

所述缓冲液IV包括：2％BSA的磷酸盐缓冲液pH7～8。

9.如权利要求4或8所述的制备方法，其特征在于，所述链霉亲和素包被的磁微粒的溶液的终浓度为1.3～2.5mg/mL；所述抗人IgE酶标抗体的溶液的终浓度为0.3～1.5mg/mL；所述校准品的终浓度为0～100IU/mL；所述生物素化-抗人IgE抗体的终浓度为1.5～3mg/mL。

10.如权利要求1或2所述的检测试剂和/或如权利要求3至9任一项所述制备方法制得的检测试剂在制备艾蒿过敏原特异性IgE定量检测产品中的应用。