[发明专利]一种用于水产品中恩诺沙星残留测定的双内标试剂及检测方法

权利要求书

1.一种用于水产品中恩诺沙星残留测定的双内标试剂，其特征在于，所述双内标试剂为恩诺沙星-D3与恩诺沙星-D5混合物，其中，所述恩诺沙星-D3与恩诺沙星-D5的质量比为1:(0.05-20)。

2.根据权利要求1所述的用于水产品中恩诺沙星残留测定的双内标试剂，其特征在于，所述恩诺沙星-D3是以环丙沙星和2,2,2-氘代溴乙烷为原料，以DMF为有机溶剂，以碘化钾和三乙胺为催化剂，在85℃条件下反应120min后制得。

3.一种水产品中恩诺沙星残留的检测方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的双内标试剂对水产品中恩诺沙星残留进行检测。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

1)在样品中加入恩诺沙星-D3与恩诺沙星-D5混合内标液，然后加入酸化乙腈，涡旋混合，超声提取，离心，取上清液过水相滤膜，得到待测溶液a；将待测溶液a稀释后得到的溶液，作为待测溶液b；

2)将待测溶液a和待测溶液b同时进行液相色谱-串联质谱仪测定。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述恩诺沙星-D3加入量为1-200ng/g，所述恩诺沙星-D5加入量为1-200ng/g，二者质量比介于1:(0.05-20)之间。

6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述酸化乙腈是由冰乙酸、乙腈和水以质量比1:84:15混合而成。

7.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，进行液相色谱-串联质谱仪测定过程中，色谱分析条件为：C18反相色谱柱，柱温40℃，进样量2μL，流动相A为0.1％甲酸溶液，流动相B为甲醇。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述流动相洗脱梯度：0-1.1min，85％A，15％B；1.1-3.5min，梯度变化到70％A，30％B；3.5-4.5，保持70％A，30％B；4.5-6.4min，梯度变化到25％A，75％B；6.4-6.46min，梯度变化到5％A，95％B；6.46-8.20min，保持5％A，95％B；8.20-8.21min，梯度变化到85％A，15％B；8.21-9.5min，保持85％A，15％B；流速为0.8mL/min。

9.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，进行液相色谱-串联质谱仪测定过程中，质谱分析条件为：采用电喷雾离子源，正离子模式，喷雾电压：4500V，碰撞气(氮气)：Medium，加热温度：550℃，气帘气：42psi，加热气1：60psi，加热气2:55psi。