[发明专利]一种兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法

权利要求书

1.一种兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，步骤如下：

将聚乙烯亚胺与含α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体溶解在溶剂中，在室温下进行aza-Michael加成反应，通过核磁共振检测产物中双键，直至双键特征峰完全消失；通过旋转蒸发仪除去溶剂得到粘稠状油性液体产物，即兼具低临界溶解温度LCST及高临界溶解温度UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺；

所述含α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体，选自下列之一：N-异丙基丙烯酰胺、N,N-二甲基丙烯酰胺、N, N-二甲基氨乙基丙烯酸酯、N, N-二乙基氨乙基丙烯酸酯；

所述聚乙烯亚胺与含α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体，聚乙烯亚胺中的胺基与α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体中的碳碳双键的摩尔比为0.2~1.0﹕1.0；

聚乙烯亚胺与含α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体溶解在溶剂中，聚乙烯亚胺和含α,β-不饱和羰基的多刺激响应性单体的质量分数10 %-50 %；

所述兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺，典型的构造式如下：

如权利要求1所述的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，其特征在于，所述聚乙烯亚胺，分子量为600 Da.、1800 Da.、10000 Da.。

2.如权利要求1所述的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，其特征在于，所述溶剂，选自下列之一：乙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、水。

3.如权利要求1所述的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，其特征在于，所述aza-Michael加成反应，属无催化反应，反应时间1-2天。

4.如权利要求1所述的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，其特征在于，所述多刺激响应性，包括温度响应性、pH响应性、盐浓度响应性和CO₂响应性。

5.如权利要求1所述的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺的制备方法，其特征在于，所述多刺激响应性荧光为聚合物簇集诱导发光。

6.如权利要求1所述的制备方法制得的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺用于细胞成像和药物控释的应用。

7.如权利要求7所述的用于细胞成像的应用，其特征在于，步骤如下：

将Hela细胞加入含质量分数为10 %胎牛血清的氨基酸葡萄糖培养基后，在体积分数5% CO₂、37 ºC环境中培养过夜。

8.然后将细胞接种到激光共聚焦皿中，继续培养12 h。

9.再将细胞用2 mg/mL的兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺培养30min，接着用pH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤三次后用共聚焦显微镜进行观察并拍照。

10.如权利要求7所述的用于药物控释的应用，其特征在于，步骤如下：

将0.2 g兼具LCST及UCST的多刺激响应性荧光聚乙烯亚胺及0.1g 维生素C溶解在2.0mL N,N-二甲基甲酰胺中，置于截留分子量为3000 Da 的纤维素透析袋中，采用1000 mL去离子水透析2 h。