[发明专利]一种君迁子带芽茎段获得再生植株的方法

权利要求书

1.一种以君迁子组培苗叶片为材料进行叶片再生培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）叶片愈伤组织的诱导：以组培苗为材料，组培苗叶片切成4 × 4mm小块，叶面向下平铺分别接种在1/2MS +1.0-3.0 mg/L 6-BA+ 0.4-0.6mg/L NAA+40 g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基中进行愈伤组织诱导；

（2）愈伤组织诱导不定芽：将以叶片诱导的愈伤组织为材料，接种到1/2MS +1.5-2.5mg/L TDZ+1.5-2.5mg/L 2IP + 0.4-0.6mg/L NAA + 40 g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基中进行不定芽的诱导；

（3）生根培养：将愈伤组织诱导的不定芽接种到1/2MS+ 1.0mg/L IBA+0.5mg/L NAA +蔗糖20 g/L+7g/L琼脂的培养基中进行生根培养。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中叶片诱导愈伤组织时使用的培养基为1/2MS + 2.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA+40g/L蔗糖+7g/L琼脂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中愈伤组织诱导不定芽时使用的培养基1/2MS + 2.0 mg/L TDZ +2.0 mg/L 2IP +0.5 mg/L NAA+40g/L蔗糖+7g/L琼脂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中叶片诱导愈伤组织培养时暗培养48h后，转到光照条件下培养；光照培养强度为50-60μmol·m^-2·s^-1，光照培养时间为14h/d；培养温度为28±1℃；

步骤（2）中愈伤组织诱导不定芽暗培养48h后，转到光照条件下培养；培养温度为28±1℃，光照培养强度为50-60μmol·m^-2·s^-1，光照培养时间为14h/d；

步骤（3）中生根培养时暗培养3d后转光照培养，光照培养温度为28±1℃，光照培养强度为50-60μmol·m^-2·s^-1，光照培养时间为14h/d。

5.据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的叶片诱导愈伤组织培养基、愈伤组织诱导不定芽培养基和生根培养基pH均调至5.7-5.8。