[发明专利]sgRNA、CRISPR/Cas试剂及其应用在审
| 申请号： | 202210758081.6 | 申请日： | 2022-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN114875033A | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 李丽莎;林清华;马丽红;刘荣华;卢雪花;林文津 | 申请（专利权）人： | 福建省医学科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/12;C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京卓胜佰达知识产权代理有限公司 16026 | 代理人： | 杨洋 |
| 地址： | 350001 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | sgrna crispr cas 试剂 及其 应用 | ||
1.sgRNA，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列。
2.CRISPR/Cas试剂，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1所示序列sgRNA、包括如SEQ IDNO.2所示序列sgRNA和包括如SEQ ID NO.3所示序列sgRNA中一种或多种sgRNA；和mRfxCas13d或RfxCas13d。
3.根据权利要求2所述的CRISPR/Cas试剂，其特征在于，RfxCas13d的氨基酸序列如SEQID NO.15所示。
4.根据权利要求2或3所述的CRISPR/Cas试剂，其特征在于，还包括转录激活因子，转录激活因子与sgRNA结合。
5.根据权利要求1所述的sgRNA的转录模板，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1所示序列sgRNA的转录模板是通过以下引物对扩增得到：上游引物包括如SEQ ID NO.4所示序列，下游引物包括SEQ ID NO.5所示序列；或包括如SEQ ID NO.2所示序列sgRNA的转录模板是通过以下引物对扩增得到：上游引物包括如SEQ ID NO.4所示序列，下游引物包括SEQ IDNO.6所示序列；或包括如SEQ ID NO.3所示序列sgRNA的转录模板是通过以下引物对扩增得到：上游引物包括如SEQ ID NO.4所示序列，下游引物包括SEQ ID NO.7所示序列。
6.根据权利要求1所述的sgRNA或权利要求2或3所述的CRISPR/Cas试剂在制备靶向斑马鱼slc25a13基因制剂中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，sgRNA靶向位点位于斑马鱼slc25a13基因第1、第5或第14个外显子上。
8.根据权利要求1所述的sgRNA或权利要求2或3所述的CRISPR/Cas试剂在制备用于降低斑马鱼Citrin蛋白表达制剂中的应用。
9.根据权利要求1所述的sgRNA或权利要求2或3所述的CRISPR/Cas试剂在培育斑马鱼中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，培育的斑马鱼为低表达Citrin蛋白斑马鱼。
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