[发明专利]抗CD2v蛋白单克隆抗体及其应用

说明书

抗CD2v蛋白单克隆抗体及其应用。本发明公开了抗CD2v蛋白单克隆抗体，所述抗体选自7B1或11H7抗体：所述7B1或11H7抗体分别包括重链可变区CDR1‑3和轻链可变区CDR1‑3，其中所述重链可变区及轻链可变区的氨基酸序列分别如序列表中所示。本发明还公开了抗体在制备用于检测、治疗和/或预防非洲猪瘟病毒产品中的应用。该抗体对于非洲猪瘟病毒具有高亲和力。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及抗CD2v蛋白单克隆抗体及其应用。

背景技术

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African swinefever virus,ASFV)感染家猪和各种野猪(如非洲野猪、欧洲野猪等)引起的严重急性、出血性、烈性传染病，病死率可达100％。非洲猪瘟病毒是一种核质双链DNA大病毒，在其基因组编码的约200种蛋白质中，有一种由EP402R基因编码的糖蛋白CD2v在ASFV病毒入侵宿主和传播扩散中发挥重要作用。

北京畜牧兽医研究朱鸿飞教授团队将ASFV Geogia 2007/1株中全长EP402R基因进行密码子优化，连入pET-28a(+)表达原核重组表达载体，用大肠杆菌系统表达，获得CD2v重组蛋白，最后用纯化的CD2v重组蛋白制备多克隆抗体。中国检验检疫科学研究院林祥梅教授团队，突破性地实现了CD2v胞外段的真核细胞表达并通过免疫小鼠制备了鼠源多克隆抗体。但是多克隆抗体特异性较差，并且难以标准化，不同批次的抗体质量差异较大。难以用于需特异性较高的实验和治疗试剂的开发。单克隆抗体无论实在检测试剂的开发还是抗体药物的研发都具有广泛的应用，尽管已经有CD2v的单克隆抗体被鉴定，然而非洲猪瘟病毒在抗体的压力下，具有高突变性，因此，更多的针对不同表位的新的抗体对于治疗是必不可少的。本发明的目的是研发识别单一表位的与CD2v具有高亲和力的抗CD2v单克隆抗体。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的之一在于提供了一种特异性识别CD2v蛋白的单克隆抗体，用于非洲猪瘟病毒检测试剂的开发；本发明目的之二在于将所述单克隆抗体用作预防或治疗非洲猪瘟病毒的药物。

为实现上述目的，本发明具体技术方案如下：

本发明第一方面提供了一种抗CD2v蛋白的单克隆抗体，所述抗体选自7B1或11H7抗体：

所述7B1抗体包含重链可变区CDR1、CDR2、CDR3和轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3；所述重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1中第31-35、50-66、99-103位氨基酸序列所示；所述轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3中第24-39、55-61、94-102位氨基酸序列所示；

所述11H7抗体包含重链可变区CDR1、CDR2、CDR3和轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3；所述重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5中第31-36、51-66、99-104位氨基酸序列所示；所述轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.7中第24-33、49-55、88-96位氨基酸序列所示。

进一步地，所述7B1抗体还包括重链可变区FR1、FR2、FR3和FR4框架区和轻链可变区FR1、FR2、FR3和FR4框架区；所述重链可变区FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列分别如SEQID NO.1中第1-30、36-49、67-98、104-114位氨基酸序列所示；所述轻链可变区FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3中第1-23、40-54、62-93、103-112位氨基酸序列所示；