[发明专利]一种杂合抗菌肽NK-LPd及其基因、载体、制备方法和应用

权利要求书

1.一种杂合抗菌肽NK-LPd，其特征在于：采用甘氨酸接头GG串联如SEQ ID NO.4所示的两个Piscidin抗菌肽重复序列和如SEQ ID NO.3所示的NK-lysin抗菌肽活性片段，得到杂合肽NK-LPd序列，杂合肽NK-LPd的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.编码权利要求1所述的杂合抗菌肽NK-LPd的基因。

3.根据权利要求2所述的杂合抗菌肽NK-LPd的基因，其特征在于，所述杂合抗菌肽NK-LPd的基因为适合于酵母表达的优化后的基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.6所示。

4.含有权利要求2或3所述的杂合抗菌肽NK-LPd的基因的重组表达载体。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述载体为SEQ ID NO.6所示序列连入质粒pPIC9K的EcoR I和Not I酶切位点处所得。

6.含有权利要求2或3所述基因或权利要求4或5所述重组表达载体的宿主细胞。

7.根据权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为毕赤酵母细胞。

8.一种制备权利要求1所述的杂合抗菌肽NK-LPd的方法，其特征在于，该方法包括将权利要求5所述的重组表达载体转化酵母宿主细胞，筛选阳性酵母转化子，诱导目标肽表达，并分离纯化表达产物。

9.权利要求1所述的杂合抗菌肽NK-LPd在制备抗菌药物、饲料添加剂或免疫增强剂中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述杂合抗菌肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌具有良好的抗菌效果。