[发明专利]一种大麦肽纳米载体及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202210740580.2 | 申请日: | 2022-06-27 |
| 公开(公告)号: | CN115286691A | 公开(公告)日: | 2022-11-04 |
| 发明(设计)人: | 宋洪东;管骁;靳祖珑;汪新月 | 申请(专利权)人: | 上海理工大学 |
| 主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12N15/29;C12P21/06;A23L29/00 |
| 代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 褚明伟 |
| 地址: | 200093 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 大麦 纳米 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种大麦肽纳米载体,其特征在于,由如下任一种或多种大麦自组装肽自组装而成:
大麦肽P1,为QQPTIQL,氨基酸序列为Gln-Gln-Pro-Thr-Ile-Gln-Leu;
大麦肽P2,为GVGPSVGV,氨基酸序列为Gly-Val-Gly-Pro-Ser-Val-Gly-Val。
2.根据权利要求1所述的一种大麦肽纳米载体,其特征在于,所述大麦肽纳米载体粒径小于100nm,亲疏水性适中。
3.编码大麦肽的多核苷酸,其特征在于,所述大麦肽选自以下中的一种或几种:
大麦肽P1,为QQPTIQL,氨基酸序列为Gln-Gln-Pro-Thr-Ile-Gln-Leu;
大麦肽P2,为GVGPSVGV,氨基酸序列为Gly-Val-Gly-Pro-Ser-Val-Gly-Val。
4.权利要求1所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)大麦蛋白的制备:
2)大麦蛋白肽的制备:
采用胰蛋白酶或α-胰凝乳蛋白酶中的一种或两种的组合对大麦蛋白进行酶解,得到大麦肽;
3)大麦肽纳米载体的制备:
将大麦肽分散于去离子水,超声,制备得到大麦肽纳米载体。
5.根据权利要求4所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,步骤1)中,大麦蛋白的制备方法为:将大麦粉碎,过筛和脱脂,将脱脂大麦粉与1-3%NaCl溶液(w/w)混合、搅拌、离心得到固体残渣;然后将固体残渣分散在70%体积分数的乙醇溶液中,水浴提取后离心收集沉淀,最后将沉淀重新分散在去离子水并调节pH至10-12进行提取,之后离心得到上清液,将上清液调pH至4.4-4.6,低温静置沉淀,水洗,冷冻干燥得到大麦蛋白。
6.根据权利要求4所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,步骤2)中,对大麦蛋白进行酶解的条件为:酶解环境pH为7-9,酶解温度30-60℃,酶与底物比例为1:25-100,酶解时间为0.5-4h;
步骤2)中,对大麦蛋白进行酶解结束后,将酶解物加热至60-100℃,然后依次冷却,调节pH至中性,旋转蒸发浓缩,冷冻干燥得到大麦肽。
7.根据权利要求4所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,步骤3)中,将大麦蛋白肽以0.1-5mg/mL的浓度分散于去离子水,溶解后首先以500-4000转/min离心去除沉淀,收集上清液,然后对上清液进行超声。
8.根据权利要求7所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,步骤3)中,将上清液置于超声波清洗仪,在超声作用下大麦肽可有序自组装形成纳米载体,超声条件为超声功率为50-600W,超声时间5-45min。
9.根据权利要求4所述大麦肽纳米载体的制备方法,其特征在于,步骤4)中,步骤3)获得大麦肽纳米载体后,还进行步骤4)大麦蛋白肽纳米载体的分离纯化,步骤4)的具体方法为:
采用色谱柱对大麦蛋白肽纳米颗粒进行分离,以去离子水为流动相,检测洗脱过程中各个洗脱峰的粒径,在214nm处测定吸光度值,收集第一个峰组分,即为纯化的大麦蛋白肽纳米载体。
10.权利要求1所述大麦肽纳米载体在包埋、增溶、稳定食品功能因子中的应用。
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