[发明专利]一种环肽化合物及其分离鉴定方法和应用

说明书

本发明一种环肽化合物及其分离鉴定方法和应用，利用溶剂萃取和各种色谱法对地蚕（又名白虫草）中的环肽成分进行分离纯化，首次分离出了一种环肽化合物，纯度高达99.8%以上，得到的一种环肽化合物具备优良的抑制α‑葡萄糖苷酶活性的作用，其在制备α‑葡萄糖苷酶活性抑制剂中具有一定的应用价值；利用本申请分离鉴定方法制备得到的环肽化合物进行抑制α‑葡萄糖苷酶活性实验，实验结果显示，地蚕环肽C对α‑葡萄糖苷酶具有较好的抑制作用，其IC50值为19.16。

技术领域

本发明涉及环肽化合物的制备工艺技术领域，尤其涉及一种环肽化合物及其分离鉴定方法和应用。

背景技术

唇形科（Lamiaceae）是被子植物的第6大科，广泛分布于世界各个地方 [1]。本科有10个亚科，220余属，3500余种。我国有99属，800余种。唇形科中的植物大多数都属于药用植物，具有抗炎、抗氧化、抗过敏、清热解毒等作用。

地蚕（Stachys geobombycis C.Y.Wu）为唇形科（Lamiaceae）水苏属（StachysLinn.）植物，俗称白虫草，土冬虫草，肺痨草，地溜儿，草石蚕等，主要生长于我国湖南、福建、江西、浙江，广西和广东等地。地蚕为多年生草本植物，高40-50 cm，花期在4-5月，一般在秋季进行采挖。本品气微，味甜，有粘性，在水中浸泡时，容易膨胀。具有清热解毒、益肾润肺和滋阴补血的功效，可用于治疗肺结核咳嗽、吐血、贫血、肺虚气喘、小儿疳积等疾病。现代研究发现该属植物的提取物具有抗肿瘤、抗氧化和抑菌等作用。

近年来，有文献表明从地蚕中分离得到三萜类、黄酮、甾体、苯乙醇苷类、有机酸和挥发油等单体化合物。到目前为止，国内外对地蚕的研究相对较少，由于地蚕具有良好的药用价值，此外，有文献表明生物碱、环烯醚萜类化合物具有很好的抑制α-葡萄糖苷酶活性。因此，为了探明地蚕药用活性的物质基础和进一步开发其药用价值，我们对地蚕进行了初步的化学成分分离鉴定和抑制α-葡萄糖苷酶方面的应用研究。结果从地蚕中分离得到的地蚕环肽C对α-葡萄糖苷酶具有潜在的抑制作用。

发明内容

本发明的目的在于：本发明利用溶剂萃取和色谱法对地蚕中的环肽成分进行分离纯化，并通过各种波谱技术和化合物的理化性质对化合物的结构进行鉴定，另外，还对分离得到的单体化合物进行抑制α-葡萄糖苷酶活性筛选，从地蚕中分离得到地蚕环肽C[cyclogeobomptide C（3）]抑制α-葡萄糖苷酶活性实验结果显示，地蚕环肽C对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制作用，其IC50值为19.16，本发明提供了一种环肽化合物及其分离鉴定方法和应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种环肽化合物，所述环肽化合物的分子式为C₄₅H₆₀N₈O₁₀，具有式I所示的结构：

式I。

本发明还提供了一种分离鉴定所述的环肽化合物的方法，包括以下步骤：

（1）将干燥的地蚕根茎粉碎，并热水浸提，得到热水浸提液；使用超滤系统对热水浸提液超滤，得到分子量大于3万的截留液和分子量小于3万的透过液；

（2）取透过液通过D101大孔树脂，再分别使用50%乙醇和95%乙醇对吸附于大孔树脂的透过液进行洗脱，得到50%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液；分别将50%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液进行减压浓缩，得到得50%乙醇洗脱液浸膏、95%乙醇洗脱液浸膏；

（3）用适量甲醇溶解95%乙醇洗脱液浸膏，再使用凝胶柱色谱进行分离，洗脱溶剂为100%甲醇，得到100%甲醇洗脱液；经TLC检测合并100%甲醇洗脱液中的相同组分，得到9个组分Fr. A′~Fr. I′；

（4）取组分Fr.F′经反向C₁₈柱分离，洗脱溶剂为50%甲醇，得到50%甲醇洗脱液；经TLC检测合并50%甲醇洗脱液中的相同组分，共得到4个组分Fr. F′-1 ~ Fr. F′-4；