[发明专利]一种健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法及应用

权利要求书

1.一种健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、供试品溶液配制

取健脾益肾丸，粉碎，精密称定粉末置于具塞锥形瓶中，加入溶剂，称定重量，超声处理，放冷，称定重量，用溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

S2、对照品溶液配制

称取甘草苷、丹酚酸B、丹酚酸A、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚溶解于溶剂中分别制得甘草苷对照品溶液、丹酚酸B对照品溶液、丹酚酸A对照品溶液、芦荟大黄素对照品溶液、大黄酸对照品溶液、大黄素对照品溶液、大黄酚对照品溶液、大黄素甲醚对照品溶液；

S3、液相色谱分析

将供试品溶液、对照品溶液在设定好的色谱条件下进样，所述设定的色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合色谱柱，柱温为25～35℃，流速为0.8～1.2ml/min，检测波长为200～280nm，进样体积为10μl，对进样溶液进行梯度洗脱、分析、记录、构建指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S1和S2中的溶剂选自甲醇或乙醇。

3.根据权利要求1所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S1中超声处理的功率为200W，频率为40kHz。

4.根据权利要求1所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S1中超声处理的时间为30～60min。

5.根据权利要求1所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S3中十八烷基硅烷键合色谱柱为Waters HSS T3，5μm，4.6×250mm。

6.根据权利要求1所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S3中梯度洗脱程序中的流动相包括A和B，所述A为乙腈，B为0.1％磷酸水溶液。

7.根据权利要求6所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S3中洗脱程序为：0～60min，A：5％～15％、B：95％～85％；60～190min，A：15％～22％、B：85％～78％；190～270min，A：22％～36％、B：78％～64％；270～390min，A：36％～70％、B：64％～30％。

8.一种根据权利要求1～7任一项所述的健脾益肾丸高效液相指纹图谱的构建方法在健脾益肾丸质量控制中应用。

9.一种同时鉴别黄芪、酒苁蓉、丹参、大黄和炙甘草中药材的高效液相色谱法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合色谱柱，所述高效液相色谱法的洗脱体系为梯度洗脱，所述洗脱体系中流动相包括A和B，所述A为乙腈，B为0.1％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，洗脱程序为：0～60min，A：5％～15％、B：95％～85％；60～190min，A：15％～22％、B：85％～78％；190～270min，A：22％～36％、B：78％～64％；270～390min，A：36％～70％、B：64％～30％。

10.根据权利要求9所述的鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中样品处理包括：将黄芪、酒苁蓉、丹参、大黄和炙甘草中药材进行粉碎，精密称定粉末置于具塞锥形瓶中，加入溶剂，称定重量，超声处理，放冷，称定重量，用溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液进行高效液相色谱进样、鉴别。