[发明专利]一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗

说明书

本发明属于医药领域，具体涉及一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗。本发明首先提供一种针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白MVSA，所述的多表位嵌合蛋白MVSA的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。小鼠体内主动免疫保护试验显示，MVSA可为小鼠抵抗致死量GBS感染提供100%保护率。同时小鼠被动免疫保护试验显示，提前注射MVSA抗体能明显的降低GBS攻毒后小鼠的脏器载菌量及脏器的促炎细胞因子水平，且为小鼠抵抗致死量GBS感染提供100%保护率。在体外，MVSA抗体可明显抑制不同血清型GBS的生长。因此，MVSA作为一种多表位疫苗，刺激机体产生的保护性抗体能抵御GBS的感染，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗。

背景技术

无乳链球菌，又称B群链球菌(Group B Streptococcus，GBS)，是一种革兰阳性细菌，可感染多种物种，包括鱼类、爬行动物、两栖动物、鸟类和哺乳动物。除动物外，GBS可在多达30％的健康女性的阴道和胃肠道定植。同时，GBS 是危及新生儿生命的主要病原体，可导致脑膜炎、败血症和肺炎。疫苗预防GBS 感染对于人类和动物的至关重要。目前的GBS疫苗针对的是细菌的多糖荚膜，但是不同血清型之间缺乏交叉保护。因此，研发一种同时为所有10种血清型GBS 提供广泛保护的广谱、多价的新型疫苗刻不容缓。近年来，成熟的基因组学、生物信息学和蛋白质组学技术使识别和执行广泛分布的抗病原体的保守免疫原性蛋白成为可能。一些病原体的表面或分泌蛋白和毒力因子被认为是候选保护抗原，如表面免疫蛋白Sip、细胞壁表面锚固定家族蛋白、CAMP因子、C5a肽酶、富含丝氨酸的重复糖蛋白Srr、鸟氨酸氨甲酰转移酶OTC等。然而，单一蛋白不能诱导有效的免疫反应，为宿主提供保护。

多表位融合抗原(Multiepitope fusion antigen，MEFA)技术是基于电脑生物学和结构生物学相结合的一种新型疫苗构建技术和平台，是将来源于不同种属的菌株或者同一菌株中表达的不同毒力因子的中和(阻断)抗原表位，利用电脑生物学和结构生物学技术整合至一个抗原中，并最大限度的模拟抗原表位本身的免疫原性，旨在构建具有广泛保护力的新型多价表位疫苗。基于MEFA技术平台设计的表位疫苗可以将多个不同来源的表位抗原整合在一起，从而使该疫苗对异源病原体具有广泛保护性，这使传统的表位疫苗的理念焕然一新。

发明内容

针对现有问题的不足，本发明的目的是提供一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是：

第一方面，本发明保护一种针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白MVSA，所述的多表位嵌合蛋白MVSA的氨基酸序列如SEQ ID No：1。

本发明还保护编码前文所述的针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白 MVSA的基因。

本发明还保护含有前文所述基因的表达盒、表达载体、转基因细胞系或重组工程菌。

第二方面，本发明保护一种针对所有GBS血清型的疫苗，其含有前文所述的多表位嵌合蛋白MVSA。

根据人类的主要组织相容性抗原等位基因(HLA)预测MVSA的全球覆盖率为88.91％。在GBS流行的地区美国(24.7％)、澳大利亚(23.8％)、加拿大(20.5％)， MVSA疫苗可分别覆盖100％、92.79％和99.2％的人口。

作为本申请的优选技术方案，所述疫苗为亚单位疫苗。

血清学试验表明，接种本发明的疫苗后产生了MVSA抗体。体外抑菌试验表明，本发明提供的MVSA抗体能显著抑制6种不同血清型GBS菌株的生长，这六种流行血清型(Ia，Ib，II，III，V，VI)覆盖GBS临床感染98.4％病例。

优选的，所述疫苗中还包含亚单位疫苗佐剂。