[发明专利]一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗在审
申请号: | 202210724875.0 | 申请日: | 2022-06-24 |
公开(公告)号: | CN115057944A | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 刘广锦;张郁敏;梁松;张时雨;张释丹 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学;三亚南京农业大学研究院 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/09;A61P31/04;C12R1/19 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 吴爽;徐冬涛 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 针对 所有 gbs 血清 多表位亚 单位 疫苗 | ||
1.一种针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白MVSA,其特征在于,所述的多表位嵌合蛋白MVSA的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。
2.编码权利要求1所述的针对所有GBS血清型的多表位嵌合蛋白MVSA的基因。
3.含有权利要求2所述基因的表达盒、表达载体、转基因细胞系或重组工程菌。
4.一种针对所有GBS血清型的疫苗,含有权利要求1所述的多表位嵌合蛋白。
5.根据权利要求4所述的疫苗,其特征在于,所述疫苗为亚单位疫苗;优选的,所述疫苗还包含亚单位疫苗佐剂,更优选的,所述亚单位疫苗佐剂为seppic ISA206。
6.一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)计算机预测GBS抗原表位:确定覆盖GBS的所有10种血清型的候选蛋白;将其进行T/B细胞抗原表位预测,然后多序列比对筛选出同时包含T、B细胞表位的多肽表位;
(2)构建MVSA蛋白:在每个表位的N端添加一个Linker片段“LRMKLPKS”,并在每对Linker表位序列之间插入第二间隔物GPGPG;将步骤(1)的表位串联并构建多肽嵌合体MVSA;
(3)构建重组质粒:以扩增产物为模板,扩增并得到MVSA蛋白基因,所述MVSA蛋白基因连接到pET-28a(+)质粒得到重组质粒;
(4)MVSA蛋白基因表达:将构建的重组质粒转化至BL21感受态细胞,经培养、提取和纯化,得到MVSA蛋白。
7.根据权利要求6所述的一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,表位分别来自于GBS自身蛋白NT5,BKD-E2,PK,GAPDH,PGK,Srr1,FbsA,Sip, AP1-2b,Beta C protein, BibA。
8.权利要求6或7所述的一种针对所有GBS血清型的多表位亚单位疫苗的制备方法得到的多表位亚单位疫苗。
9.如下任一应用:
(1)权利要求1所述的多表位嵌合蛋白在作为或制备针对所有GBS血清型的亚单位疫苗中的应用;
(2)权利要求1所述的多表位嵌合蛋白在作为或制备由于预防所有GBS血清型感染的药物中的应用;
(3)权利要求2所述的基因、权利要求3所述的表达盒、表达载体、转基因细胞系或重组工程菌在制备权利要求1所述的嵌合蛋白MVSA的中的应用。
10.一种针对所有GBS血清型的疫苗或药物,其活性成分为权利要求1所述的多表位嵌合蛋白MVSA。
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