[发明专利]一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用，属于生物医药领域中活疫苗耐热保护剂技术领域。提供的耐热保护剂包含5‑10重量份的蔗糖、5‑10重量份的麦芽糊精、0.5‑1重量份的抗坏血酸、1‑3重量份的聚乙烯吡咯烷酮、1‑3重量份的甘氨酸、1‑2重量份的羧甲基纤维素和3‑5重量份的胰蛋白胨，其成分简单、原料易得，利用其配制猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂时可以有效减少冷冻干燥过程中各病毒抗原的损失，并可确保猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂的免疫效力和长期稳定保存。

技术领域

本发明属于生物医药领域中活疫苗耐热保护剂技术领域，具体涉及一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用。

背景技术

猪传染性胃肠炎是由传染性胃肠炎病毒感染引起的一种高度接触性急性传染性疾病，该种疾病传播速度较快，年龄越小的猪潜伏期越短，通常在潜伏12-24h后会出现典型的临床症状，最长潜伏期在4d左右。养殖场出现个别患病病例后，通常经历3-4d能快速爆发流行，在出现临床症状10d左右会进入流行高发期，之后呈现逐渐缓和的态势。

猪流行性腹泻病毒的发生流行具有典型季节性，是冬春季节高发的一类病毒性传染性疾病。不同年龄不同品种的猪对流行性腹泻病毒均具有很强异感性，哺乳仔猪、断奶仔猪发病率有时高达100％，成年猪群的发病率通常在15％-20％。哺乳阶段的仔猪受到病毒感染后，所表现的死亡率最高，有时死亡率在50％以上。

为预防猪传染性胃肠炎和/或猪流行性腹泻疾病在猪场的蔓延，需要对猪只提前接种疫苗(目前通常为活疫苗，例如猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗)。然而，由于猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒均不耐热，60℃30min可使病毒丧失感染力，因此当活疫苗中的冻干保护剂(或称为耐热保护剂)的保护效力不足时，会容易导致疫苗在生产过程中以及在接种之前的保存期发生病毒抗原的损失，进而会导致疫苗的免疫效力不足。因此，开发一种耐热保护效果好的冻干保护剂是获得免疫效力足且保存期长的活疫苗的关键。专利文献CN106729731A(以下称文献1)已经公开一种用于猪传染性胃肠炎、流行性腹泻二联活疫苗的疫苗耐热保护剂，其按照重量配比包括明胶6％-12％、海藻糖1％-8％、蔗糖20％-30％、胰蛋白胨6％-15％、水解乳蛋白1％-8％、酶解酪蛋白5％-20％、硫脲1％-5％、甘氨酸0.1％-3％、右旋糖酐0.1％-2％和甘露醇0.1％-2％。虽然该文献1提供的耐热保护剂能够减少病毒抗原在冻干过程中的损失(几乎无损失)，但是将该文献1配制的疫苗置于37℃保存7天后病毒抗原的损失仍较多(最低损失0.4个滴度/ml，最高损失0.8个滴度/ml)，因此该文献1提供的耐热保护剂对疫苗的保护效果仍有不足，并且该文献1没有公开其耐热保护剂对疫苗的长期(例如2-8℃下保存24个月)保护效果。

发明内容

针对现有技术中存在的一个或多个问题，本发明的一个方面提供一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂，其按重量份计包含以下组分：

在一些实施方式中，所述耐热保护剂按重量份计包含以下组分：

本发明另一方面提供一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂，其按重量体积百分比含量(％，单位为g/100ml)计包含以下组分：

其余为注射用水。

在一些实施方式中，所述耐热保护剂按重量体积百分比含量计包含以下组分：

其余为注射用水。

本发明另一方面还提供一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂的制备方法，其包括以下步骤：